由于外泌體的特殊結構和功能,使得它具有潛在的應用價值,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,另一方面也可以作為治病手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。外泌體的分離純化一直是科研工作者關注的問題,獲得高純度的外泌體對后續的研究至關重要。據了解,目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試劑盒等方法實現外泌體的提取分離。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(如細胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質,在體內參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發生和進程密切相關。這些試劑盒不需要特殊設備,隨著產品不斷更新換代,提取效率和純化效果逐漸提高。成都正規外泌體提取試劑生產廠家
外泌體可通過流式、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測,普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,樣本含量低,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。外泌體是細胞間進行物質運輸和信息交流的重要工具,可以通過調節免疫功能促進一些病癥的增殖,血管新生和一些病癥轉移。與細菌傳染,幫助細菌逃避免疫關系很大,并與心血管疾病,老年癡呆等疾病具有密切關系。長沙外泌體提取試劑廠家供應外泌體提取:超離法因操作簡單,獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎。
外泌體相關miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調或壓制靶mRNAs來調節轉錄水平上的基因表達,目前非編碼RNA被普遍發現存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復合物與多個mRNA結合,從而阻滯整個生物通路。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環游離miRNA的表達,與75例健康者相比,發現了兩種高表達的miRNA(miR-25和miR-223)。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個miRNA的表達進行了評估,結果顯示,12個一些病癥相關的miRNA*在肺病患者中過度表達。Cazzoli等收集了30個血漿樣本,發現4種外泌體miRNA(miR-378a、-379a、-139-5p、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908。離心除去細胞器,留取上清。
外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法外泌體提純試劑盒的特色與優勢:無需蛋白酶處理。
外泌體(exosomes)是活細胞經過"內吞-融合-外排"等一系列調控過程而形成的膜性囊泡,來源于晚期核內體(也稱為多囊泡體),直徑約為30-150nm,密度在1.13-1.21g/ml,天然存在于血液、唾液、尿液及母乳等體液中,同時外泌體也存在于組織和細胞間隙中。人體中幾乎所有類型的細胞均能產生外泌體,人體中大約有1014個外泌體,大約平均每個細胞產生1000-10000個。外泌體中含有核酸(DNA、miRNA、lncRNA、mRNA、tRF等)、蛋白和脂類,在細胞間物質和信息轉導中發揮重要作用,研究表明其在干細胞、免疫調控、瘤轉移、血管生成以及生物標志物等領域都發揮著不可替代的作用。外泌體提取:超離法是較常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行。武漢正規外泌體提取試劑銷售廠家
嚴重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應用上的發展。成都正規外泌體提取試劑生產廠家
可以。為了能夠高效提取細胞培養上清中的外泌體,磁珠可重復使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收,提取時可進行反復抽提,提高提取效率。用血液樣品進行實驗時,需要根據磁珠狀況來判斷是否能重復利用;若磁珠發生聚集,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,不建議繼續使用。詳情參考操作說明書。太好了,這樣實驗成本瞬間就降下來了,那樣品純化所需的比較低量是?老師:使用旋轉器的需要500μL以上,使用離心管混合器的需要100μL。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠。同學:電鏡分析需要外泌體的量是多少?成都正規外泌體提取試劑生產廠家
蘇州君欣生物科技有限公司是一家生產型類企業,積極探索行業發展,努力實現產品創新。是一家有限責任公司企業,隨著市場的發展和生產的需求,與多家企業合作研究,在原有產品的基礎上經過不斷改進,追求新型,在強化內部管理,完善結構調整的同時,良好的質量、合理的價格、完善的服務,在業界受到寬泛好評。公司始終堅持客戶需求優先的原則,致力于提供高質量的原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養基,動物疾病模型。蘇州君欣生物科技將以真誠的服務、創新的理念、***的產品,為彼此贏得全新的未來!