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河南免疫組化檢測

來源: 發布時間:2024-05-30

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色? 

(1)縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。

(2)一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。

(3)內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色; 

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(4)非特異性組分與抗體結合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果; 

(5)縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等; 

(6)適當增加PBS沖洗次數和浸洗時間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要; 

(7)防止標本染色過程中出現干片,這容易增強非特異性著色。 英瀚斯生物為您詳解免疫組化實驗指南!河南免疫組化檢測

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細胞屬性的判定,免疫組化也可以進行這方面的臨床應用。通過特定抗體標記出細胞內相應的抗原成分,來判定細胞的屬性,確定cancer的來源。如細胞角蛋白(CK)是上皮性標記,CK陽性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質纖維酸性蛋白(GFAP)陽性則提示膠質cancer;CD20和CD79a陽性則提示B細胞淋巴瘤;平滑肌肌動蛋白(Actin)陽性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質瘤中原cancer基因蛋白產物CD117陽性;血管源性cancer中內皮細胞標記物CD34陽性等等。如果您需要做實驗外包,可以與我們英瀚斯生物進行聯系。寧夏病理免疫組化注意事項英瀚斯生物自有專業病理染色實驗室,可做免疫組化。

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免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標記物必須具有的,但至今所發現的cancer標記物還沒有能完全滿足這些標準。某些正常細胞也分泌一些cancer標記物,因此cancer細胞學并不是單獨產生一種標記物,即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當的陽性與陰性對照,作為技術完整性質量控制,如對照組被忽略或不理想時,免疫組化染色的結果要謹慎對待,免疫組化的正確結果不僅要依靠技術步驟上規范化操作,而且有賴于正確的解釋,在報告免疫組化染色結果時不應孤立地解釋,應考慮到診斷與鑒別診斷、所應用的抗體特性、所研究組織性質,同時還要注意假陽性與假陰性結果的干擾。

免疫組化技術應用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對于反應性增生還是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細胞增生的單克隆或多克隆性來區別。在濾泡反應性增生時,濾泡反應中心的細胞不表達細胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性濾泡細胞有bcl-2的高表達,bcl-2陽性。而增殖細胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過對cancer細胞增生的程度作出評價,從而提示增生細胞的良惡性。英瀚斯生物免疫組化,高效高質量出結果。

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免疫組化結果中的假陰性是指所有抗體標記的切片均呈陰性,無陽性信號,假陰性結果不是真實的反應。導致假陰性結果的原因有:(1)抗原修復方法選擇不當,根據不同的抗原特點采用不同的修復方法,大多數抗體要求熱修復,熱修復又包括高壓修復、微波修復及煮沸熱修復;而對某些細胞內抗原和細胞間質抗原需要用酶消化,如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,而Vimentin則不用修復;(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結果的假陰性會導致錯診或漏診,進而影響臨床診斷及延誤醫療。解決這一問題的可通過設立陽性對照,比較兩者染色結果。若陽性對照有表達,表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達,則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題,應逐一查找原因。英瀚斯生物,可做免疫組化定量分析。四川靠譜免疫組化

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確定來源不明的轉移瘤的原發部位,臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉移瘤,用免疫組化技術有助于確定惡性cancer的組織學來源,進一步確定原發部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫療及預后提供了依據。河南免疫組化檢測

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