HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養(yǎng)細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。比較常見的病理染色HE染色？河北性價比高的HE染色檢測

HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法，是**基本的病理學(xué)染色技術(shù)。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍，如處理適宜，可使細胞核著清楚的深藍色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細胞核與細胞漿藍紅相映，鮮艷亮麗；2.胞核鮮明、核膜、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見；3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點及假物質(zhì)成分均能顯示出來。山東性價比高的HE染色外包HE染色，優(yōu)先南京英瀚斯生物。

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改變組織等電點，促進伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合，其本身不參與染色的反應(yīng)。當蘇木素染色效能極高，很短時間就導(dǎo)致核漿共染時，可適當?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%)，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時間，同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現(xiàn)在有商用的HE染色液賣，但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標志之一)。

HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化，調(diào)整細胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時間后，取出細胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片。若細胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可冰凍切片是否可以做HE染色？

HE染色常見問題：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）組織未及時固定，部分自溶；或固定不佳，深部組織未處理到。這種只能重新固定了。（2）盡管乙醇也是一種固定液，但盡量少用或不用，因為其會導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆，染色效果不好。（3）包埋時蠟的溫度過高，或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好，可能會導(dǎo)致無法染色。（4）脫蠟不徹底；染料有問題；分化過度導(dǎo)致的顏色變淡，鏡下組織界限不清；染完后的脫水和透明不佳，水霧殘留在組織上。（5）通風(fēng)窗中（防止空氣中的水霧），戴口罩操作封片（減少哈氣帶來的水霧）。關(guān)于HE染色，你不知道的實驗技巧。陜西性價比高的HE染色價格

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HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后，進行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機進行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進行染液染色的時候，染液可以充分進入組織種，同時，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。河北性價比高的HE染色檢測