HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少，幅度太小；可延長脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號(hào)驗(yàn)證。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短，切片上水分沒有烤干，也會(huì)導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域。HE染色小貼士以及相關(guān)技巧分析。上海結(jié)果客觀的HE染色公司

HE染色法，。蘇木精染液為堿 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸染料 ，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見，活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色，再在高倍鏡下觀察。從人或動(dòng)物新鮮尸體上取下塊（一般厚度不超過0.5厘米）投入預(yù)先配好的固定液中（10%福爾馬林，Bouin氏固定液等）使、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固，以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解，從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明，以二甲苯替換出塊的中酒精，才能浸蠟包埋。吉林值得信賴的HE染色報(bào)告HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。

HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因：（1）組織處理溫度過高、過熱，在石蠟停留的時(shí)間過長；（2）固定時(shí)間太短，接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對(duì)策：理論上來說，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過長時(shí)間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時(shí)再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。

HE 染色是病理的主要常規(guī)染色，其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異，組織結(jié)構(gòu)對(duì)不同染料的結(jié)合程度不同，我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核，Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì)，染色優(yōu)良的片子可以幫助我們?cè)陲@微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調(diào)整，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟冰凍切片是否可以做HE染色？

HE染色常見問題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來水(一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對(duì)策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。HE染色規(guī)范化流程及注意事項(xiàng)？新疆推薦的HE染色外包

常用HE染色試劑配制方法。上海結(jié)果客觀的HE染色公司

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對(duì)策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑，重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤，盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變?cè)颍禾K木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對(duì)策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時(shí)更換。其次，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間。上海結(jié)果客觀的HE染色公司