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江西結(jié)果客觀的HE染色分析

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-02-09

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,分化液分化,自來水洗,返藍(lán)液返藍(lán),流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結(jié)果判讀:細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。江西結(jié)果客觀的HE染色分析

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HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色過程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。新疆結(jié)果客觀的HE染色服務(wù)HE染色取材和樣本保存方式。

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HE染色在**染色中的應(yīng)用,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,生長迅速,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,預(yù)后非常差。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),包括巢狀、小梁狀、實(shí)性片狀,常有菊形團(tuán)形成,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,一般小于三個(gè)靜止的淋巴細(xì)胞,呈圓形、卵圓形或短梭形,胞質(zhì)稀少,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,核分裂象每十個(gè)高倍視野大于十一個(gè),常見大片狀壞死。

HE染色原理:一、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對外不顯電性,此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比脾臟組織HE染色如何觀察。

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HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來。科研常備實(shí)驗(yàn)操作之HE染色。浙江質(zhì)量好的HE染色多少錢

HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法。江西結(jié)果客觀的HE染色分析

HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來水(一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。江西結(jié)果客觀的HE染色分析

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