HE染色常見問題：Q3：細(xì)胞核染色過淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效，或分化時(shí)間太長(zhǎng)。對(duì)策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個(gè)3-5min即可，接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來水沖洗10min染色。Q4：細(xì)胞核染色過深，胞漿著藍(lán)色答：切片在蘇木素染液中停留過長(zhǎng)；或切片太厚；或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。常用HE染色試劑配制方法。海南靠譜的HE染色外包

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長(zhǎng);或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定；對(duì)于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上，然后自來水漂洗5min，可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補(bǔ)充染色媒介，增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。內(nèi)蒙古推薦的HE染色報(bào)告HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。

HE染色知識(shí)點(diǎn)1：對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的，應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明，有特殊要求（如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等）應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系，并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理。知識(shí)點(diǎn)2：組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上，根據(jù)診斷的需要，確定取材的部位和塊數(shù)。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記，以便鏡檢時(shí)核對(duì)。另外，盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影，并編號(hào)存檔南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。

HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對(duì)原因：（1）伊紅染液的pH值可能大于5；（2）藍(lán)化液殘留過多；（3）切片太薄；（4）切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長(zhǎng)。對(duì)策：檢查伊紅染液的pH值，如果必要的話，用乙酸將其調(diào)節(jié)在4～5之間，從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍(lán)化步驟完成后，使用的弱堿性溶液被充分洗去，玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長(zhǎng)，因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩?huì)將伊紅的顏色分化掉。HE染色規(guī)范化流程及注意事項(xiàng)？

HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚，固定過久，導(dǎo)致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時(shí)，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時(shí)間過短或脫蠟液使用過久，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn)，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng)。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) 。海南靠譜的HE染色外包

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HE染色常見問題：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）組織未及時(shí)固定，部分自溶；或固定不佳，深部組織未處理到。這種只能重新固定了。（2）盡管乙醇也是一種固定液，但盡量少用或不用，因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆，染色效果不好。（3）包埋時(shí)蠟的溫度過高，或切片后烤片時(shí)間和溫度過久過高都不好，可能會(huì)導(dǎo)致無法染色。（4）脫蠟不徹底；染料有問題；分化過度導(dǎo)致的顏色變淡，鏡下組織界限不清；染完后的脫水和透明不佳，水霧殘留在組織上。（5）通風(fēng)窗中（防止空氣中的水霧），戴口罩操作封片（減少哈氣帶來的水霧）。海南靠譜的HE染色外包