外泌體表面有其特異性標(biāo)記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實(shí)驗(yàn),難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40 - 150nm的膜泡,存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測(cè)可找英瀚斯生物,測(cè)序、電鏡、粒徑分析都可做。外泌體檢測(cè)服務(wù),經(jīng)驗(yàn)豐富,操作熟練。內(nèi)蒙古細(xì)胞外泌體價(jià)格
外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn), 1987年Johnstone將其命名為“exosome”。現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。江西專門做外泌體靠譜的外泌體檢測(cè)服務(wù)平臺(tái),南京英瀚斯。
外泌分離后可以做蛋白,也可以做RNA(microRNA和LncRNA),36%的研究人員通過Westernblot或其他方法來(lái)鑒定蛋白,29%的人員利用qPCR對(duì)microRNA表達(dá)譜進(jìn)行分析,9%利用芯片進(jìn)行microRNA表達(dá)譜分析。同時(shí),新一代測(cè)序的用戶也不少,13%的人員利用NGS開展microRNA/小RNA研究,9% 開展mRNA研究。此外,目前的大部分工作還是停留在科研階段,后續(xù)的生物標(biāo)志物開發(fā)和驗(yàn)證不多,而診斷和療法的開發(fā)就更少。Razvi認(rèn)為,exosome的定性和定量研究是個(gè)快速發(fā)展的市場(chǎng)。同時(shí),循環(huán)生物標(biāo)志物的市場(chǎng)也存在著機(jī)遇和挑戰(zhàn)。不過,無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)技術(shù)的成功讓人們相信,循環(huán)生物標(biāo)志物有望在**及其他疾病的診斷上發(fā)揮作用。
外泌體鑒定分為三個(gè)層面:透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)、Nanosight粒徑、蛋白標(biāo)志物。透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,可觀測(cè)樣本中是否存在外泌體樣結(jié)構(gòu)(通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形),同時(shí)可測(cè)量外泌體大小。外泌體表面存在特異性標(biāo)志物分子,如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式細(xì)胞術(shù)的鑒定結(jié)果。外泌體(Exosome)參與細(xì)胞之間的交流,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過程的維持、還與許多疾病息息相關(guān)。南京英瀚斯生物,外泌體檢測(cè)服務(wù),很靠譜。
外泌體由細(xì)胞在正常和病理?xiàng)l件下釋放。攜帶幾種類型的貨物分子,如核酸和蛋白質(zhì),因此,被認(rèn)為是至關(guān)重要的生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)對(duì)于臨床診斷。載有腫瘤特異性RNA的外泌體被用作**診斷的生物標(biāo)志物,外泌體蛋白被認(rèn)為是多種疾病的潛在生物標(biāo)志物,包括**、肝臟疾病和腎臟疾病。它們含有多種生物標(biāo)志物,如TSG101、帶電荷的多泡體蛋白2a(CHMP2A)、RAS相關(guān)蛋白R(shí)abb-11b(RAB11B)、CD63和CD81蛋白和脂類,包括膽固醇、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺和磷脂酰絲氨酸。外泌體的大分子成分在細(xì)胞功能和病理狀態(tài)中發(fā)揮重要作用,如炎癥、免疫反應(yīng)、血管生成、細(xì)胞死亡、神經(jīng)退行性疾病和**。南京英瀚斯,外泌體檢測(cè)服務(wù),分離鑒定都能做。青海推薦的外泌體粒徑分析
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外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的作用也備受關(guān)注,特別是在阿爾茨海默病、帕金森病和腦卒中等疾病中。神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞都能分泌外泌體,這些外泌體能參與神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的重塑、炎癥反應(yīng)的調(diào)控和病理蛋白的傳播。例如,在阿爾茨海默病中,外泌體可攜帶Aβ或磷酸化Tau蛋白,在細(xì)胞間傳播,從而加速病理進(jìn)展。另一方面,一些外泌體也具有神經(jīng)保護(hù)作用,如含有miR-124的干細(xì)胞來(lái)源外泌體可促進(jìn)神經(jīng)再生。因此,調(diào)控外泌體的分泌與作用,有望成為***神經(jīng)系統(tǒng)疾病的新策略。內(nèi)蒙古細(xì)胞外泌體價(jià)格