外泌體(exosome)是多種活細胞經過“內吞–融合–外排”等一系列過程主動向胞外分泌的直徑為30~150nm的雙層膜結構細胞外囊泡(extracellularvesicles,EVs),廣fan存在于血液、尿液和唾液等生物體液中,并通常作為細胞間胞質蛋白、核酸和脂質的轉移載體發揮運輸調控作用,被認為是細胞間通訊的核xin部分。外泌體于1983年在HARDING等和PAN等研究羊網織紅細胞分化的過程中被發現,并于1996年由RAPOSO等證實能夠作為一種細胞間通訊結構在免疫系統中發揮作用后得到了廣fan關注。近年來,隨著外泌體在中流、心血管和感ran性疾病等多種疾病形成中的生物學作用和功能被逐漸揭示,尤其是2015年MELO等發現,外泌體Glypican-1蛋白可有效區分慢性胰腺炎與胰腺ai以來,外泌體作為疾病診斷、預后預測標志物以及藥物靶向zhiliao載體的轉化醫學應用也得到了迅速的推進。外泌體具有檢測包括病癥在內的許多病理狀況的潛力，可用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監測。杭州外泌體western blot

研究采用蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀，極大地降低了外泌體的提取成本，且獲得的外泌體不僅表達外泌體公認的標志蛋白分子，同時也表達胎盤特異性蛋白分子，證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經蛋白質SDS-PAGE膠電泳，銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見，動態光散射分析粒徑，結果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間，與文獻報道外泌體顆粒大小相一致。胎盤外泌體經過PKH67熒光染料染色后，與細胞共孵育，熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進入細胞的活性，進一步驗證了我們應用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體，并從蛋白標志分子、電鏡、粒徑及分布、進入細胞活性四方面對其進行了鑒定，為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發癥中的作用奠定了基礎。植物提取試劑盒報價超離法是較常用的外泌體純化手段。

外泌體的miRNA或蛋白質等遺傳分子與肝臟病理息息相關，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點或分子標志物。對外泌體的研究，將有利于闡述肝臟及其疾病的發生和發展機制，為尋求臨床可用的biomarkers和開發新的治理方法提供支持。外泌體可以通過轉運蛋白和miRNAs進行細胞間交流，從而作用于周圍的細胞并改變肝臟的微環境。細胞內多泡體（MVBs）與細胞膜融合，釋放內部的外泌體到細胞外，被其他細胞攝取，通過細胞膜融合或內吞作用釋放攜帶的內含物，在受體細胞中調控生理活動。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。

外泌體的形成始于細胞內陷，成熟于多囊泡胞內體，終于膜融合。細胞通過內吞作用產生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內體（earlyendosome），在多個蛋白的協同調控下，早期胞內體出芽形成含有多個腔內小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個過程中這些腔內小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會裝載各種核酸和蛋白質等分子，泡內體較后在GTPase家族中RAB酶的調節下與細胞膜融合。隨后，這些小囊泡會被釋放到細胞外，稱為外泌體。外泌體是通過細胞內吞細胞膜融合主動排除的物質，大小均勻，而微泡是由細胞直接出芽脫落生成，大小不均一。外泌體是包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30–150nm)，由所有體外和體內細胞持續分泌。

外泌體起源于多泡體,以細胞管腔內囊泡的形式存在.細胞的胞吞形成帶有外源性抗體的內體小泡,在高爾基體等細胞器的作用下形成早期核內體,早期核內體的囊膜內陷、突入形成多個小囊泡,并選擇性的接受細胞內的蛋白質、核酸、脂類等成分,較終形成晚期核內體,晚期核內體與細胞膜融合,并將外泌體排出胞外。這是一個連續而又復雜的過程,從內體小泡到成熟外泌體,需要在各細胞器間傳遞并包裝,包括:TSG101、Alix蛋白、CD63、CD81、神經酰胺、膽固醇等。外泌體的排出跟其他胞內小泡大致相同,受到Rab家族蛋白的調控,敲除細胞的Rab27a和Rab27b蛋白后,外泌體不能排出,且從高爾基體到晚期核內體的囊泡運輸不受影響。外泌體被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。calnexin蛋白 外泌體

外泌體具有良好的生物兼容性、穩定性和內在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。杭州外泌體western blot

外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內吞入靶細胞,或直接將內容物釋放到靶細胞內,從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發生膜融合,導致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應。通過介導細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內陳舊分子、呈遞抗原、分化調節性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應,而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質、促進中流轉移過程中的血管生長和中流細胞遷移。杭州外泌體western blot

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