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吉林外泌體脂質組學

來源: 發布時間:2024-01-15

瘤在生長過程中會不斷地將外泌體釋放到周圍環境中去,同時,外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時間,可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術的進步,已經有生物公司嘗試涉足外泌體領域,外泌體中存在黑色素瘤標志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關蛋白,且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者,通過檢測MIA和S100B表達水平對黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質上說,液態活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸,進一步豐富了檢測手段,而隨著外泌體的不斷揭秘,相信其會在液態活檢中發揮越來越重要的作用。結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。吉林外泌體脂質組學

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外泌體中包含的mRNAs和miRNAs在進入受體細胞后仍具有翻譯蛋白質、促進病毒感ran等功能。據估計,單個外泌體含有約≤100拷貝數的蛋白質和≤10000拷貝數的核苷酸。不同細胞來源的外泌體中既包含與細胞形成、結構和物質轉運相關的共有成分,也包含與來源細胞的生物功能相關的特異分子。如B淋巴細胞、樹突狀細胞、肥大細胞和腸上皮細胞來源的外泌體含有大量的主要組織相容性復合體蛋白質MHCclassⅡ和MHCclassⅠ,血小板和T細胞來源的外泌體則包含諸如血管性血友病因子、穿孔素和顆粒酶等特殊蛋白質,而ai細胞來源的外泌體表面可能含有中流特異的蛋白質分子。這類特異分子在外泌體介導細胞信號轉導、參與生理病理過程中發揮至關重要的作用。細胞外泌體提取試劑盒生產廠家外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。

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通過對28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進行深度測序分析,發現兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調,表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標志物。Khurana等[100]將研究對象由miRNAs擴大至多種類型RNA,通過對慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進行系統研究,在慢性腎病患者組中識別出30種明顯差異的lncRNAs,表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質能夠作為前列腺ai的新型標志物,3種脂質標志物結合使用能夠有效提高對前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%)。

利用蛋白質免疫印跡和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體標志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印跡是外泌體的經典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體標志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,內參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體標志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質,隨后與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題,相比較而言,酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印跡法更加快速,適用于高通量分析。外泌體就像是生物界的郵差,可以在細胞間運輸和轉移生物活性分子,是細胞間通訊交流的載體。

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科學家也嘗試利用外泌體的壓制發病機制功能。例如,類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發生。隨著今后的研究發展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。干細胞外泌體通過改變細胞外基質,改變受體細胞的轉錄組和蛋白質組,調節細胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。組織外泌體提取試劑盒報價

外泌體可以作為藥物治理的遞送系統。吉林外泌體脂質組學

為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細胞源的蛋白和脂質,眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細胞通過翻轉酶作用導向細胞膜內側,暴露在外泌體膜外側3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細胞進行細胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結合4)。基于上述知識,我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學醫學系免疫學華山教授共同開發,并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標準超速離心法的新型外泌體純化方法。吉林外泌體脂質組學

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