1.基本檢查:是確定精液變量穩定的常規方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法,但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關于精子活力分級,第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調,精子形態學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態率的判斷,則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液,應單獨計算并在報告中注明;全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗水平,廣泛應用于泌尿科,男性科以及計劃生育、優生優育研究等。北京快速運動精子分析W.H.O 4
七、精子形態檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2.精液中紅細胞增多,常見于精囊結核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞,對生殖系*有診斷意義。馬精子分析DAPHamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時間內處理大量樣本,提高工作效率。
五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80:**后120分鐘內活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多,是導致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降。六、精子計數[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計數小于20×109/L或一次排精總數少于1×108為不正常,見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無精癥,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結扎術2個月后精液中應無精子,否則說明手術失敗。3.老年人從50歲開始精子數減少以至逐步消失。
CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術手段對精子活力、濃度和形態進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調,相比人工檢測,CASA提供更準確的數據和精子動力學參數,如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數。研究顯示,CASA檢測的精子參數與體內外受精成功率和受孕時間有***關聯。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學分析。但要確保可靠結果,操作者需注意標本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內已有自主研發的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結果通過統計學分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數板的精確性和計數一致性是關鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。全自動精子分析儀嚴格按照世界衛生組織(WHO)和KRUGER標準,并通過ISO9001認證。
通過比較進行質量評估1.室內比較是采用同一個標本在同一參數下?經CASA多次測定后?應用適當的統計學方法對測得數值進行比較。在男科實驗室中對CASA系統的質量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標本進行日間比較。當室內比較作為結果質量的一種評估時?計算機中數值的在線獲得是極具優勢的。2.室間比較要求標本向其他幾個實驗室運送文獻中的一些報道闡述了該方面的經驗但是運動精子是不能在不受限制的條件下運輸的將其置于液氮中運送需進一步考慮更多的因素(解凍技術、標本的處理等)這些因素會影響活動力參數;到目前為止室間比較的研究還未見滿意報道;Jorgensen等進行了研究嘗試克服實驗室間運送解凍標本的困難其研究方式是:邀請四個實驗室的實驗人員攜帶各自的儀器到同一個地點以各自通常采用的實驗方法進行精子評估但未見明確的結論。3.對于精子活力測定CASA系統的測定與直觀評估的比較有文獻進行了報道但結果并不相同。認為直觀評估揭示標準數值且其差異是由CASA系統的錯誤引起的該觀點是不正確的;無論從理論上還是實踐中CASA數值比直觀評估所獲得的數值更接近于真值;對直線前進的精子比例而言這一點是非常正確的。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數,擺動性(WOB)?:實際的曲線路徑關于平均路徑的擺動值。北京快速運動精子分析W.H.O 4
CASA系統可以給出多種精子運動狀態的參數,這些參數能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。北京快速運動精子分析W.H.O 4
CASA系統雖然有諸多優點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統進行**分析應注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數具有溫度敏感性,因此要求計數池應于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現錯誤的結果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。北京快速運動精子分析W.H.O 4