HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對分析根據質量控制的要求,對新精子分析系統進行性能驗證后,應與舊系統進行一致性評價,從而保證檢測結果的準確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結果:兩臺儀器的方法內和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數均能符合比對要求,檢測結果具有相關性;對實驗儀器的檢測結果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經比對分析顯示符合質控要求。結論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結果具有可比性,檢測結果一致,可同時用于臨床標本的檢測。精子分析儀參數,平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。慢速運動精子分析DSL
CASA系統也可用于精子形態學評估。CASA系統可用來定量分析精子頭部形態學、中段甚至主段的形態,可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數、標準差和中位數,以及對染色的精子頂體區進行測量[3]。與人工操作相比,自動化系統更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優于有經驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經提示在CASA結果與生育力之間存在***聯系。Coetzee等發現自動分析的正常精子形態的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發現**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。上海快速運動精子分析ALHHamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。
人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內容,更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存;對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序;所有儲罐都應有液位監控報警系統,以監測溫度和液氮液位,傳感器應連接警報器,可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統,不需要無菌的液氮。
精液顯微鏡檢查精子計數:正常人精子計數為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數為400×106~600×106。當精子計數值<20×106/ml或一次排精總數<100×106為精子減少,超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導致少精或無精的重要原因,也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結扎術的效果觀察。結扎六周后,連續檢查無精子,說明手術成功,如果結扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術不成功。傳統的CASA系統仍使用傳統閾值圖像處理方法,準確率有待提高。
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數;變異系數(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。CASA系統用量少,檢測速度快,能夠顯著提高實驗室的工作效率。美國魚精子分析DSL
精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數。慢速運動精子分析DSL
七、精子形態檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2.精液中紅細胞增多,常見于精囊結核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞,對生殖系*有診斷意義。慢速運動精子分析DSL