Dulbecco’s改良培養基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養基的基礎上研制的，與MEM培養基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對***的細胞培養應用，我們提供多種組分的DMEM改良培養基。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產，例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。不含葡萄糖的培養基可以根據研究需要，隨意調節葡萄糖的濃度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養元素，但其在溶液中不穩定，會自發降解，不含L-谷氨酰胺的培養基，可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統。河南醫用細胞培養基廠家直銷

    Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型，在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養應用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養元素，但其在溶液中不穩定，會自發降解，不含L-谷氨酰胺的培養基，可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝。 云南實驗細胞培養基全國發貨Eagle培養基是一種基本、適用范圍廣的培養基，是動物細胞培養中常用的培養基之一。

    細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史，細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養素，但其在溶液中不穩定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定，不會自發的降解。細胞利用其機制是：在細胞培養時，細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似，連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無需適應，并且可以延長細胞的培養時間，減少傳代次數，即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比，活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需要。Dulbecco’s 改良培養基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。

    無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細胞貼壁生長，包括以下幾大類物質：1）促貼壁物質：一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2）促生長因子：針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些是許多細胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。RPMI-1640培養基初是為淋巴細胞培養專門設計的，現在已應用于各種正常細胞ai細胞的培養。云南實驗細胞培養基全國發貨

Ham’s F-12營養混合物（Ham’s F-12 Nutrient Mixture）是由Ham以Ham’s F-10營養混合物為基礎設計而成的。河南醫用細胞培養基廠家直銷

    Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型，在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養應用，我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續監測培養液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養液呈黃色，而較高的PH值時使培養液呈紫色，PH值～，**適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），比較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，是體外培養中為預防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合，抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 河南醫用細胞培養基廠家直銷

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