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來源: 發(fā)布時間:2021-12-09

高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn)。線性達 3000 mAU,噪音級別降至 ±3 μAU,比較低分散和基線噪音。專業(yè)高效液相色譜系統(tǒng)優(yōu)惠價格

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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時間(retentiontime,tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。《中國藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)。《中國藥典》規(guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。安徽賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)優(yōu)惠價格低擴散性的10 mm 和 60 mm流通池可以為特定的應(yīng)用提供極高的靈敏度和極寬的線性。

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液相色譜類型液相色譜按其分離機理,可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法吸附色譜法吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內(nèi)部。與氣相色譜不同,流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發(fā)生吸附作用。在吸附劑表面,樣品分子與流動相分子進行吸附競爭,因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響,一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類的組成分析。

高效液相色譜的歷史1903年俄國植物化學(xué)家茨維特(Tswett)***提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國學(xué)者Martin和Synge基于他們在分配色譜方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個重要嘗試,但分離效率尚不理想。1960年中后期,氣相色譜理論和實踐發(fā)展,以及機械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進步,液相色譜又開始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機技術(shù)用于液相色譜,進一步提高了儀器的自動化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國際和國內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類基因組計劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。Vanquish 系統(tǒng)的分流進樣器 HT 模塊的單瓶容量可滿足 208 次進樣,開箱即用。

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高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:①高壓:流動相為液體,流經(jīng)色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。②高速:分析速度快、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時。③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到比較好分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數(shù)量級。⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢。⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少、容易回收:樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。液相色譜系統(tǒng)選哪家?給您推薦上海禹重!進口液相色譜系統(tǒng)采購

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高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時間,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,應(yīng)用十分***。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4)。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。高效液相色譜更適宜于分離、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。專業(yè)高效液相色譜系統(tǒng)優(yōu)惠價格

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