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外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年，將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前，市場已經有應用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits，該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器，但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養液4℃孵育過夜，之后再低速離心。外泌體提取：樣本的粘度與分離的外泌體純度有顯著的相關性。蕪湖外泌體提取試劑產品介紹功能：當...

1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規...

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機...

作為一種分子通斷開關的KRAS發生突變時會處于“開啟”狀態。在80%～95%的胰腺導管腺病（PDAC）當中，這個基因發生突變，這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實iExosome能夠運送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他們的合成對應物脂質體（liposome）更加高效。脂質體不具有外泌體表現出的天然復雜性和優勢。德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學助理教授ValerieLeBleu博士說，“我們的研究提示著與脂質體相比，外泌體表現出運送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優異能力。我們也證實外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環單核細胞...

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質分子結合共沉淀，早先應用于從血清等樣本中收集病毒，現在也被用來沉淀外泌體，其原理可能與競爭性結合游離水分子有關。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性），顆粒大小不均一，產生難以去除的聚合物，機...

外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢，表面由脂質和蛋白質組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性，可以穩定存在于血液中，納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，...

Exosome，中文名外泌體，是一種能被大多數細胞分泌的微小膜泡，具有脂質雙層膜結構，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發現，但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年，人們發現這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質和核酸，能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發現點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發現外泌體在很多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構，能很好的保護其包被的物質，且能靶向特定細胞或...

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒，組分經過優化處理，適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD...

外泌體鑒定：參與生物功能的分子，如凋亡轉接基因2互作蛋白X（ALIX）、一些病癥易感基因101蛋白（TSG101）、熱休克蛋白（HSP70、HSP90），以及細胞分泌的特異性蛋白。外泌體高通量檢測。外泌體內含有與細胞來源相關的蛋白質和核酸，可以運輸蛋白質、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等進入受體細胞，參與細胞間通訊。不同細胞來源的外泌體所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作為多種疾病的早期診斷標記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病治病。1.miRNA高通量測序。2.mRNA高通量測序。3.lncRNA芯片（人、小鼠）。4.ceRNA芯片（人、小鼠）。5.蛋白質組分析（iTR...

如果您正在或者準備或者計劃開展外泌體研究，歡迎加入我們的外泌體小課堂。首先，來個自我介紹：(實物照)品牌背景FUJIFILMWako前身為和光純藥株式會社，企業，也是全球前列的試劑供應商，在歐美都設有分公司。自成立以來一直致力于的試劑生產與開發，并獲得ISO9001、ISO/IEC17025、ISO14000等多項國際認證。2017年被大佬FUJIFILMGroup（富士膠片集團）斥收購（你沒看錯，就是做相機、膠卷的那個富士），更名為富士フイルム和光純薬株式會社（FUJIFILMWako）。外泌體提取試劑盒是FUJIFILMWako的明星產品哦，有關外泌體、如何成功獲取高質量的外泌體等問題，請...

1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規...

外泌體與肺病預后：外泌體mirRNA和蛋白質被認為是NSCLC的預后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預后的生物標志物時發現，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外，還有研究表明，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復發率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發現，NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統分析了28位NSCLC患者體內的365種miRNA，其中let-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體的提取的方式：1、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。2、PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據，表明PS法可提取相當高純度的外泌體。六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不...

外泌體提取：尺寸排阻色譜。尺寸排阻色譜（Size-exclusionchromatography，SEC）是基于大小而非分子量實現分離大分子。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子，分子根據其直徑通過微球，半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移，而大分子則從色譜柱中更早地洗脫。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外，可以將不同的洗脫溶液應用于該方法。與離心方法相比，色譜分離已被證明具有更多優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會改變囊泡的結構。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術。不過，該方法耗時較長，不適合大量樣本處理外泌體提取：用這種聚合物沉淀具...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現已證實可以分泌外泌體的細胞有：肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質干細胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。同時，不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。細胞外囊泡是蛋白質、mRNA、miRNA和脂質運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介，根據它們的大小和發生分為三類，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡...

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養液或生物流體獲得外泌體，經過400×g、2000×g、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單，不需要復雜的技術支持，并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時、產率低，得到的外泌體的數量和質量很大程度上受轉子的類型、轉子沉降角度等因素影響，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體，但也會有其他的囊泡、蛋白質或蛋白和RNA的聚集體。目前人們多采用超速離心、免疫磁珠、超濾、沉淀或試...

外泌體提純試劑盒的特色與優勢：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細胞培養基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無需耗時的超速離心，過濾或特殊注射器；無需沉淀試劑，也無需過夜培養；無需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機體內大多數細胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號分子，形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統，影響細胞的生理狀態并與多種疾病的發生與進程密切...

外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內陷形成一個杯狀結構，包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白，導致早期胞內體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內質網也能協助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內體(late-sortingendosomes，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內凹(即質膜雙凹)形成的，這一過程導致MVBs含有多個ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚...

外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢，表面由脂質和蛋白質組成，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運輸效率和靶向性，可以穩定存在于血液中，納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，...

由歐洲多國細胞外囊泡領域的學者發起并成立的國際細胞外囊泡協會（ISEV）于2014年在協會會刊JournalofExtracellularVesicles發表了一個指導性意見，也就是我們常說的MISEV2014。2018版《指導要求》進行了修訂。2018版的《指導要求》首先討論了對這些細胞來源的非細胞具膜結構如何稱呼。學者們普遍認為應當使用細胞外囊泡（extracellularvesicle）來稱呼這些具膜囊泡，當我們使用常規方法分離這些結構時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體的提取方法：超速離心法（差速離心）。北京正規外泌體提取試劑直銷廠家外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經過一系列鑒定才...

1983年，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規...

外泌體的形成與鑒定：首先，細胞膜內陷形成一個杯狀結構，包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白，導致早期胞內體(early-sortingendosome，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合；trans-高爾基體和內質網也能協助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內體(late-sortingendosomes，LSEs)，較終形成MVBs(也稱為多囊內小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內凹(即質膜雙凹)形成的，這一過程導致MVBs含有多個ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合，較終降解或與質膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚...

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到質疑；此外，重復離心操作還有可能對囊泡造成損害，從而降低其質量。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下，使蔗糖溶液形成從低到高連續分布的密度階層，是一種區帶分離法。通過密度梯度離心，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時，對離心時間極為敏感。由于外泌體的特殊結構和功能，使得它具有潛在的應...

外泌體在肺病進程中的作用：在一些病癥微環境中，一些病癥細胞來源的外泌體能夠誘導CD4+T分化為調節性T細胞，壓制機體的抗一些病癥免疫反應；肺病細胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細胞中結合并啟動TLR8，使TLR介導的NF-κB信號通路活化，從而導致一些病癥的生長和轉移。在肺病的侵襲和轉移過程中，細胞間通訊扮演著重要的角色。據有關報道稱，NSCLC分泌的外泌體內TGFβ和IL10的高表達與肺病的轉移密切相關。此外，啟動的T細胞可以通過調控Fas信號通路增加基質金屬蛋白酶9（MMP9）的表達，進而促進肺病的轉移。這些機制有望成為肺病治病的潛在靶點。雖然大多數外泌體都是促進一...

外泌體（Exosome）是細胞主動分泌的囊泡樣小體，大小均一，直徑30-200nm，密度1.10-1.18g/ml，來源普遍，幾乎所有細胞都可分泌，在血液，尿液，唾液，腦脊液，腹水，乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發現于培養的綿羊紅細胞上清液中。1996年，研究者發現外泌體作為抗原呈遞因子參與T細胞依賴的抗一些病癥反應，開啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫學獎解答了細胞如何組織其內部較重要的運輸系統之一——囊泡傳輸系統的奧秘。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數量較多而廣受?歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩定，純度也受到質疑。由于國內有關外泌體提取試劑的缺乏，我國對外...

功能：當外泌體在1980年初次被發現后，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質構成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發現外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了一些病癥的生長與侵襲。外泌體提取：免疫分離外泌體的原理大多是通過抗體包被的微球，特異性結合外泌體。合肥正規外泌體提取試劑直銷廠家外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-ex...

外泌體的提取分離：1、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實驗，難以普遍普及。如何高效地提取外泌體是實現這項新興液體活檢技術臨床常規化應用的關鍵。成...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現已證實可以分泌外泌體的細胞有：肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質干細胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。同時，不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。細胞外囊泡是蛋白質、mRNA、miRNA和脂質運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介，根據它們的大小和發生分為三類，包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡...

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱，首先被流動相洗脫出來；小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強地滯留，更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。用無菌針管吸取上層含有外泌體...

外泌體提純試劑盒的特色與優勢：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細胞培養基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無需耗時的超速離心，過濾或特殊注射器；無需沉淀試劑，也無需過夜培養；無需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結合蛋白；可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體，以評估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體（exosomes）是一種能被機體內大多數細胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號分子，形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統，影響細胞的生理狀態并與多種疾病的發生與進程密切...