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蘇州細胞培養(yǎng)支原體預防價格

來源: 發(fā)布時間:2024-07-24

方法

靈敏度

優(yōu)勢

劣勢

培養(yǎng)法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金標準

ü 費勞力

ü 耗時長

ü 需要特定的培養(yǎng)基

ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 可能假陽性可能性

間接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易檢測

ü 費時

ü 需要細胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客觀,易判讀結果

ü 可以鑒別支原體種屬

ü 受抗體限制

ü 價格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可檢測支原體種屬

ü 價格略高

ü 可檢測的支原體種屬有限

放射自顯影

☆☆

ü 迅速

ü 難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

ü 費勞力

生物發(fā)光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 難以判讀結果

ü 無法鑒別支原體種屬

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特異性

ü 結果可靠

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 無需DNA提取

ü *需10min左右的實驗操作時間

ü 具有特異性

ü 高通量

ü 可能假陽性可能性

ü 檢測特異性依賴引物特異性 細胞培養(yǎng)中支原體污染的后果?蘇州細胞培養(yǎng)支原體預防價格

細胞培養(yǎng)中支原體檢測出現(xiàn)假陽性結果可能由以下原因引起:
1. 擴增產(chǎn)物污染:PCR擴增產(chǎn)生的大量DNA拷貝若未妥善處理,極微量的污染就可能導致假陽性結果。
2. 引物設計不當:引物設計不夠特異性,可能會與非目標序列發(fā)生反應,導致非特異性擴增。
3. 試劑質量問題:使用的dNTPs、引物、DNA聚合酶等試劑質量不佳,可能引起非特異性擴增或假陽性結果。
4. 操作技術問題:實驗操作不規(guī)范,如混合樣本、標簽錯誤或樣本標識不清等,可能導致假陽性結果。
5. PCR反應條件設置不當:不恰當?shù)腜CR反應條件,如溫度和時間選擇不當,可能導致非特異性擴增。
6. DNA污染:PCR環(huán)境中的DNA污染會干擾結果,導致假陽性
細胞培養(yǎng)支原體檢測試劑價格支原體及污染方式有哪些?

qPCR法,即定量聚合酶鏈式反應(QuantitativePolymeraseChainReaction)法,在支原體檢測中的應用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:

1. 快速定性檢測:qPCR法可以快速檢測生產(chǎn)原料、細胞庫、病毒種子、病毒或細胞收獲液、治*用細胞中潛在的支原體污染。
2. 臨床樣本檢測:qPCR法可用于檢測實驗室樣本及臨床樣本中的支原體,具有快速、特異性強、靈敏度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。
3. 監(jiān)管要求:基于TaqMan的qPCR測定專門針對檢測細胞治*和復雜生物生產(chǎn)樣本中的支原體而開發(fā),其性能滿足或超出監(jiān)管要求,如10CFU/mL。
4. 藥物質量控制:qPCR法提供早期檢測支原體污染的方法,適用于藥物質量控制,具有快速、高度特異性、靈敏性,并符合國際準則。

LAMP法,即環(huán)介導等溫擴增法(Loop-mediated isothermal amplification),在支原體檢測中的應用具有以下特點和應用場景:
1. 日常監(jiān)測:由于LAMP法的快速和簡便性,它適用于生物實驗室的日常監(jiān)測,可以及時檢測出支原體的存在,確保實驗結果的準確性和可靠性。
2. 疾病診斷:LAMP法已被成功應用于SARS、禽流感、HIV等疾病的檢測中,并在2009年甲型H1N1流感事件中發(fā)揮了重要作用。
3. 臨床應用:LAMP法在臨床樣本的檢測中顯示出了快速、高靈敏度和穩(wěn)定性,可以用于檢測實驗室樣本及臨床樣本中的支原體。
4. 多病原體檢測:LAMP法可以同時檢測多種病原體,包括肺炎支原體在內的多種下呼吸道感*的病原體,為臨床診療提供詢證依據(jù)。
5. 與其他技術結合:LAMP法可以與CRISPR-Cas12a等其他技術結合,建立新的檢測方法,提高檢測的效率和準確性。
支原體檢測實驗的方法?

支原體是一類細菌,由于缺乏細胞壁,具有靈活的膜結構。這使得支原體的形態(tài)多變,很難在高倍顯微鏡下識別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水,對許多針對細胞壁合成的常見抗*素具有抗性。它們的體積非常小,直徑通常在0.15~0.3μm,因此能夠輕易地穿過過濾系統(tǒng)。支原體能在哺乳動物細胞培養(yǎng)中可以高濃度生長,而不引起明顯的混濁或其他可見的污染跡象。
支原體通過特殊的前端細胞器與宿主細胞結合。支原體前端細胞器富含粘附素,可以附著在真核細胞上并穿透宿主細胞。支原體缺乏剛性細胞壁,可能有助于其與宿主細胞膜融合,并交換其膜和細胞質成分。支原體的對細胞的毒性包括支原體侵襲性、分泌的致病酶和一些膜成分等都能夠有效地侵犯宿主。
支原體的檢測方法有哪些?細胞培養(yǎng)支原體檢測試劑價格

細胞被支原體污染了會有什么影響?蘇州細胞培養(yǎng)支原體預防價格

細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結果產(chǎn)生多方面的影響,具體包括:
1. 細胞生長受影響:支原體污染可能導致細胞生長速度減慢,甚至停滯。
2. 細胞形態(tài)改變:支原體感*的細胞可能會出現(xiàn)形態(tài)的改變,如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細胞功能改變:支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細胞產(chǎn)物改變:支原體感*可能影響細胞產(chǎn)生的蛋白質、細胞因子等生物活性物質的表達和分泌。
5. 實驗結果不準確:支原體污染會干擾實驗結果的準確性,導致實驗數(shù)據(jù)不可靠。
6. 實驗重復性差:支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復性。
7. 影響后續(xù)實驗:支原體污染的細胞培養(yǎng)產(chǎn)物用于后續(xù)實驗,如轉染、基因編輯等,可能會影響實驗效果。
8. 影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質量:支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的質量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費額外的時間和成本進行檢測、處理和重復實驗。
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