熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下：1）熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5－3外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。在實際應用中，并非所有的PCR實驗都要求變溫速率越快越好。有的檢測試劑對PCR的升溫或降溫速率有一定要求。821PCR儀咨詢

較高的升溫速度配合獨有的2D-梯度功能使X50PCR成為了分子生物學進階研究乃至生物制藥上游開發的得力工具，而更強的溫度控制功能使PCR優化進入全新時代，人性化用戶管理以及完善的文檔記錄功能使工作井井有條，并符合相關的合規要求簡潔直觀的觸屏界面，低噪音、低能耗，以及適應性極強的flexlid®熱蓋，處處體現出X50的強大和與眾不同。高達10臺機器可直接并組成網，適用于高通量應用或者人員眾多需求復雜的實驗室如果需要更高的靈活性和通量，更可通過電腦將多達50臺的機器組網運行。821PCR儀咨詢PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。

理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：①引物長度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。⑤引物3’端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列好有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

梯度PCR已成為優化反應條件的。一個可任意程控高達20oC的溫度梯度不僅能夠優化退火溫度，而且可以優化每個PCR操作步驟中所有溫度，甚至苛刻的應用。由于艾本德的SteadySlope技術確保了的、恒定的升降溫速率，這意味著梯度實驗的結果能簡便而準確地用于常規應用中。整個艾本德的Mastercycler家族都配備個人儲存卡系統。以芯片為基礎的儲存卡不僅可以簡單可靠地在不同的MastercyclerPCR儀之間轉移您的個人程序，而且確保了儲存容量的擴展。PCR技術的原理類似于DNA的天然復制過程，由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成。

型號ETC8212模塊規格0.2mlx96,鋁合金模塊，可定制384模塊，原位模塊，平板模塊。3有效孔位96孔（單管，8聯排，12聯排，無裙邊，半裙邊），384孔板，以及定制其它孔位4溫度準確性≦±0.1℃5模塊控溫精度≦±0.1℃6模塊溫度均勻性≦±0.3℃@55℃7大升溫速率≧5℃/s8大降溫速率≧5℃/s9模塊控溫技術3路帕爾貼控溫+分布式模塊溫度補償10模塊控溫模式Tube/block11模塊溫度設置范圍0-105℃12熱蓋溫度及設置范圍30-105，on/off（熱蓋可開啟或關閉）13恒溫時間設定范圍1-9h,可設置為∞表示長時間運行14智能熱蓋設置功能有，可選根據程序自動設定熱蓋溫度15溫度曲線實時顯示有，實時顯示模塊及熱蓋的溫度16溫度梯度/范圍/跨度12列梯度，溫度范圍30-99℃，梯度跨度，1-42℃。17溫度遞變有，大±10℃/Cycle18時間遞變有，大±120s/Cycle19循環次數設置范圍1-150X,可設置非交叉雙重嵌套循環。20升降溫速率設定范圍有，0.1-3.5℃/s，等速變溫。ETC811差異化特點： 操作方便、自動化、注冊證，功能特定，無梯度，96孔，單臺或多臺使用使用頻度中。深圳ETC811PCR儀銷售

實時熒光定量 PCR技術原理與應用聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。821PCR儀咨詢

高效的等速率變溫：在實際應用中，并非所有的PCR實驗都要求變溫速率越快越好。有的檢測試劑對PCR的升溫或降溫速率有一定的要求。尤其是有些臨床試劑，如耳聾基因檢測試劑盒，要求保持恒定的升溫速率或降溫速率，以確保PCR反應的結果。經過長期的技術積累和算法優化，ETC811提供了近乎完全的線性控溫曲線。智能抑制小體系試劑蒸發：在PCR儀的控溫算法中，為了加快block與試劑間的溫度平衡，縮短PCR反應時間，往往采用溫度過沖的控制模式。但對于小體系反應的PCR實驗，過高的溫度過沖會使試劑溫度接近水沸點從而引起試劑蒸發甚至蒸干，使整個實驗前功盡棄。多年的控溫技術積累，使得ETC811PCR儀即使在5-15ul的小體系下實驗，試劑也不會蒸發，以保障實驗的成功。821PCR儀咨詢

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