實時熒光定量PCR儀在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號采集系統和計算機分析處理系統，形成了具有熒光定量功能的PCR儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同，在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統，得出量化的實時結果輸出。熒光定量PCR儀有單通道，雙通道和多通道之分。當只用一種熒光探針標記的時候，選用單通道；有多種熒光標記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標記和目的基因表達產物，因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量，需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，實現一次檢測多種目的基因的功能。熒光定量PCR儀主要應用于臨床醫學檢測、生物醫藥研發、食品行業、科研院校等。熒光定量檢測技術在臨床診斷方面很多，主要集中在各種病原體引起疾病的臨床診斷，如肝炎類疾病、性功能病、與優生優育相關的疾病以及肺結核等等。PCR技術的原理類似于DNA的天然復制過程，由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成。PCR輔助工具PCR儀試用

PCR儀讓您能夠同時運行兩個完全不同的程序。樣品數量小的實驗可以利用32孔模塊進行，超過48個樣品數量的實驗可以利用64孔模塊進行，64孔模塊還提供了梯度功能。作為Mastercyclernexus家族的一員，MastercyclernexusX2可以與nexus家族中其他產品形成三聯機系統，您可以根據具體需求選擇不同儀器組合類型，而且所有PCR儀均配備相同的軟件，操作簡便將MastercyclernexusX2與EppendorfPCR管、PCR聯管或者可拆分PCR板配合使用，可信且一致的結果也是唾手可得。PCR輔助工具PCR儀試用在實驗室中，用梯度PCR儀進行PCR反應條件的優化篩選時，往往有時間和溫度兩個變量。

圖形化程序編輯、直觀簡便，中文操作界面通用樣品槽，適用0.2ml/0.5mlPCR管和PCR板梯度模塊采用SteadySlope®梯度技術，12列溫度梯度flexlidTM熱蓋可自動調節高度，適應不同實驗耗材TSP樣品溫控保護技術，減少非特異性擴增一臺Mastercyclernexus梯度或普通PCR儀可連接兩臺Mastercyclernexuseco經濟型PCR儀USB接口可連接鼠標、U盤和打印機等，方便儀器操作、數據傳輸和程序擴展具E-mail提醒功能可選配USB加密狗，對半導體元件進行快速檢測低能耗、體積小巧、超靜音運行。

技巧提示：只需鍵入“9500500”b)95度30秒：點擊選中STEP2，點擊“EDIT”可進行第2步參數的輸入，與上步類似，連續鍵入“950”“0030”點擊OK；i.技巧提示：只需鍵入“9500030”c)55度30秒：點擊選中STEP3，點擊“EDIT”可進行第3步參數的輸入，與上步類似，連續鍵入“550”“0030”點擊OK；i.技巧提示：只需鍵入“5500030”d)72度30秒循環30次：點擊選中STEP4，點擊“EDIT”可進行第4步參數的輸入，與上步類似，連續鍵入“720”“0030”，隨后光標移動至Goto，如果想回到第二步可鍵入“02”，在Cycle處鍵入循環次數例如“30”，點擊OK即可完成一個普通的PCR程序的設定。i.技巧提示：只需鍵入“72000300230”。PCR工作機制及高級使用 PCR的工作機制 PCR由一系列復雜的化學反應，包含前、中、后三個階段。

理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：①引物長度：15-30bp，常用為20bp左右。②引物擴增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。⑤引物3’端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列好有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。在實際應用中，并非所有的PCR實驗都要求變溫速率越快越好。有的檢測試劑對PCR的升溫或降溫速率有一定要求。深圳檢測系統PCR儀性能

平均擴增效率的理論值為100%，實際反應初期，靶序列DNA的片段的增加呈指數形式。PCR輔助工具PCR儀試用

型號ETC8212模塊規格0.2mlx96,鋁合金模塊，可定制384模塊，原位模塊，平板模塊。3有效孔位96孔（單管，8聯排，12聯排，無裙邊，半裙邊），384孔板，以及定制其它孔位4溫度準確性≦±0.1℃5模塊控溫精度≦±0.1℃6模塊溫度均勻性≦±0.3℃@55℃7大升溫速率≧5℃/s8大降溫速率≧5℃/s9模塊控溫技術3路帕爾貼控溫+分布式模塊溫度補償10模塊控溫模式Tube/block11模塊溫度設置范圍0-105℃12熱蓋溫度及設置范圍30-105，on/off（熱蓋可開啟或關閉）13恒溫時間設定范圍1-9h,可設置為∞表示長時間運行14智能熱蓋設置功能有，可選根據程序自動設定熱蓋溫度15溫度曲線實時顯示有，實時顯示模塊及熱蓋的溫度16溫度梯度/范圍/跨度12列梯度，溫度范圍30-99℃，梯度跨度，1-42℃。17溫度遞變有，大±10℃/Cycle18時間遞變有，大±120s/Cycle19循環次數設置范圍1-150X,可設置非交叉雙重嵌套循環。20升降溫速率設定范圍有，0.1-3.5℃/s，等速變溫。PCR輔助工具PCR儀試用

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