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江蘇基因編輯整合位點報告

來源: 發布時間:2024-04-29

2018年CTL019的一項臨床試驗中,一名B-ALL病人在接受CAR-CD19zhiliao28天后即達到CR,卻在6個月后復發,PCR檢測沒有發現任何的RCL,結合持續性慢病毒插入位點的克隆豐度分析,研究者較終發現一個攜帶CAR插入位點的CAR-B細胞克隆。進而發現這個B細胞是CAR-T生產過程中的一個CAR-B副產物,而CAR在該B細胞上的順式插入表達導致CAR靶標表位屏蔽,導致該B細胞克隆的耐藥。這個案例也提示除去CAR-Tzhiliao方法本身的潛在風險外,CAR-T在生產工藝也會產生二次成瘤的風險。含有完整的外源DNA全部整合結構、插入位點旁側序列和受體基因組在整合位點附近重排結構的CCS reads。江蘇基因編輯整合位點報告

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對確證性臨床試驗的療效和安全性要求:“繼續監測安全性風險,分析重要的已知和潛在的風險信息,包括遲發性不良事件(如致瘤性)的發生率、 嚴重性和危險因素等,并有必要采取措施使風險較小化。" 2021年2月發布的《基因修飾細胞zhiliao 產品非臨床研究與評價技術指導原則(試行)》則明確將"插入突變風險評估"作為非臨床安全性研究的內容,并詳細規定關鍵風險因素的評估要點。可見慢病毒載體整合位點檢測已經成為細胞zhiliao 產品IND評審及臨床試驗安全性評估的必檢內容。蘇州AAV整合位點報告通過分選CAR-T 細胞,對T細胞受體(TCR)β鏈庫進行深度測序(TCR-seq)以及慢病毒載體整合位點(LVIS)分析。

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不同基因zhiliao產品的特殊考慮1.關于整合性載體的特殊考慮如受試者接受整合性載體基因zhiliao產品,例如轉座子元件、γ-逆轉錄病毒、慢病毒及其他逆轉錄病毒載體,或利用整合性載體或基于轉座子的載體在體外修飾的細胞,長期隨訪中需格外關注基因zhiliao產品的基因組整合風險,建議申辦方分析基因zhiliao載體在靶細胞或相關替代細胞的基因組中整合的影響(例如是否存在克隆性生長、是否存在優勢克隆、克隆性生長是否導致惡性liu等)。如果基因組整合相關風險的分析可行。

基因編輯產品建議觀察15年或至數據表明不再存在任何風險。?腺相關病毒載體建議觀察5年或至數據表明不再存在任何風險。以上長期隨訪時間的建議主要基于基因zhiliao的產品類型,具體產品的隨訪時間取決于產品的特性和體內存在時間、轉基因表達時間、遲發性不良反應的預期時間及發生率、受試者適應癥和預期生存期、給藥途徑、以及長期隨訪的其他觀察目的。隨著隨訪數據的積累,研究者和研究申辦方可能會根據產品的存在情況、轉基因表達和臨床表現的持續評估情況,延長或縮短長期隨訪的持續時間。如果研究申辦方認為其基因zhiliao產品安全性風險較低、無需開展長期隨訪臨床研究,或者希望變更隨訪時間,應合理說明依據或變更理由并與藥品監督管理部門進行溝通。迎細胞基因浪潮,整合位點分析方法來助力。

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給藥間隔,對于shou次在人體中開展臨床試驗(firstinhuman,FIH)的免疫細胞zhiliao產品,采用受試者間隔給藥的方式,可以避免多個受試者同時暴露而出現預期外的安全性風險。在FIH試驗中,對首例患者應加強不良事件監測,還要考慮遲發性不良事件。向同一劑量組內下一例受試者或下一個劑量組受試者給藥前,應規定一定的隨訪間隔,以觀察急性和亞急性不良事件。間隔期的選擇一般基于非臨床研究中急性或亞急性毒性的發生情況,細胞在體內的活性持續時間和/或既往類似產品在人體中的應用經驗。非病毒定點整合CAR-T技術的開發和應用。江蘇基因編輯整合位點報告

整合位點技術,推薦唯可生物,實驗實力強,專業性高,檢測效率高,結果準確率高。江蘇基因編輯整合位點報告

細胞和基因療法通常儲存在低溫至chaodi溫的溫度下。這些溫度使產品有更長的保質期,同時保持比較大效力。管理這些敏感材料(包括存儲、運輸和跟蹤)需要強大且適應性強的系統,以確保機構審查所需的安全性、完整性和法規遵從性。在存儲和處理臨床階段樣品和材料時,它們的脆弱性怎么強調都不為過。從液氮冷凍箱中手動取出材料,會使目標和非目標材料迅速升溫,從而產生意想不到的后果。隨著時間的推移,反復暴露也會產生復合效應。例如,如果將一盒樣品從 -180 ?C 移至環境條件,大約有90秒的時間,盒子中材料開始跨越玻璃轉化溫度,即到達發生降解的點。一些自動化低溫存儲設備被設計成在整個檢索過程中保持生物材料遠低于其臨界溫度,降低了降解的風險。江蘇基因編輯整合位點報告

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