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北京基因編輯整合位點安評

來源: 發布時間:2024-05-01

對確證性臨床試驗的療效和安全性要求:“繼續監測安全性風險,分析重要的已知和潛在的風險信息,包括遲發性不良事件(如致瘤性)的發生率、 嚴重性和危險因素等,并有必要采取措施使風險較小化。" 2021年2月發布的《基因修飾細胞zhiliao 產品非臨床研究與評價技術指導原則(試行)》則明確將"插入突變風險評估"作為非臨床安全性研究的內容,并詳細規定關鍵風險因素的評估要點。可見慢病毒載體整合位點檢測已經成為細胞zhiliao 產品IND評審及臨床試驗安全性評估的必檢內容。AAV整合位點,推薦唯可生物,實驗實力強,專業性高,檢測效率高,結果準確率高。北京基因編輯整合位點安評

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例如,對于經過基因修飾的免疫細胞zhiliao產品如CAR-T,采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(qPCR)和流式細胞術(Flowcytometry)進行PK分析,分別通過測定外源基因拷貝和CAR+細胞數量的變化,有助于互相驗證檢測方法的可靠性,可以更duomian的分析產品在體內的擴增和存活情況。對于大多數免疫細胞zhiliao產品,可以通過細胞和/或體液免疫應答分析藥效學活性。有多個特異性靶點的zhiliao產品,應分析其對每個靶點的作用活性。如果細胞經體外基因修飾,在體內分泌特定蛋白、多肽或其它活性成分,或敲除了特定基因的表達,也需要進行針對性的藥效學分析,如檢測特定蛋白的活性、持續時間和變化情況等。北京AAV整合位點非病毒定點整合CAR-T技術的開發和應用。

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CAR-T慢病毒載體整合的潛在安全性隱患包括CAR-Tzhiliao在內的基因編輯性細胞zhiliao方法,采用慢病毒整合性載體將外源基因插入整合到細胞基因組中,某些插入位置可能會導致關鍵基因突變或jihuo原基因,從而導致惡性liu風險增加。因載體整合導致致瘤性基因變異及新發細胞變稱為二次成瘤。在持續性細胞zhiliao過程中,這種潛在的成瘤性不良反應的發生時間往往會有明顯的滯后性且很難預測。因此CAR-Tzhiliao需要評估潛在的插入突變風險和致性風險。

免疫細胞zhiliao產品的劑量描述,很多免疫細胞zhiliao產品的細胞組成并非均一,往往包含多種類型的細胞,起主要zhiliao作用的可能是其中一種細胞類型,但不良反應可能受同一產品中其它類型細胞的影響。在描述免疫細胞zhiliao產品的劑量時,需要考慮產品的特定屬性,例如細胞類型和來源(自體與同種異體來源等)、轉導效率、單個細胞的載體平均拷貝數和細胞活力、效價和生物學活性等。在尚無法明確不同細胞亞群對活性作用或不良反應的影響時,明確終產品中的細胞亞群和所占比例,并比較不同細胞亞群對臨床結局的影響,可能有助于識別與產品安全性和有效性較相關的細胞亞群。整合位點安全性評價,推薦唯可生物,實驗實力強,專業性高,檢測效率高,結果準確率高。

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免疫細胞zhiliao產品的風險水平與多種因素有關,如細胞來源和類型、體內活性和存活時間、是否有外源基因表達、基因表達使用的載體類型以及是否存在基因組整合等。針對不同風險水平的免疫細胞zhiliao產品,隨訪持續時間的建議如下:?對于沒有外源基因表達、且體外操作不改變細胞存活時間及分化潛能的免疫細胞zhiliao產品,長期隨訪的持續時間不應短于細胞在體內的自然存活時間,建議對受試者進行1年或以上的隨訪。22?對于有外源基因表達、但不存在基因整合或基因重組風險,或載體的基因整合或重組風險較低的免疫細胞zhiliao產品,建議對受試者進行不少于5年的隨訪。?對于有外源基因表達、而且表達載體存在基因整合或有基因重組風險的免疫細胞zhiliao產品,建議對受試者觀察不少于15年。整合位點相比γ-逆轉錄病毒更安全但成本更高。南通整合位點實驗室

慢病毒整合位點如何進行分析,用什么產品進行分析呢?北京基因編輯整合位點安評

病人在6個月后達到MRD陰性,CAR-T細胞在4.2年后仍然可以在外周血檢測到,并且骨髓中檢測不到B細胞liu克隆。二代測序整合位點分析顯示這是因為某些CAR-T細胞的融合位置位于TET2基因9號到10號外顯子之間可變剪切區域,導致TET2基因跳讀和功能障礙,從而產生短壽命記憶細胞擴增和長壽命記憶細胞。使得藥物可以持久作用于病人。研究者繼而進行插入位點和CAR-T細胞擴增及持續作用時間的相關研究,利用慢病毒插入位點信息(INSPIIRED)和LASSO logistic 回歸模型進行插入位置和藥效學分析,初步建立預測模型。研究者還建議在CAR-T產品回輸前進行類似的多變量預測可以對產品的安全性和有效性進行更為有效的評估。北京基因編輯整合位點安評

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