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深圳ISA整合位點(diǎn)報(bào)告

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-02

當(dāng)產(chǎn)品預(yù)期的活性成分可以明確時(shí),申請(qǐng)人往往選擇較能代預(yù)期活性的特定細(xì)胞亞群來描述產(chǎn)品劑量,例如,很多導(dǎo)入外源基因的免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品中的載體陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。在這種情況下,申請(qǐng)人還應(yīng)描述載體陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與其它細(xì)胞成分的比例,并分析轉(zhuǎn)導(dǎo)效率對(duì)患者安全性及有效性的影響。劑量遞增,在惡性liu患者中開展早期探索性臨床試驗(yàn)時(shí),申請(qǐng)人經(jīng)常選擇3+3、改良毒性概率區(qū)間(mTPI)和貝葉斯比較好區(qū)間(BOIN)等設(shè)計(jì)。對(duì)于shou次開展人體臨床研究的免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品,在選擇劑量探索試驗(yàn)每個(gè)劑量組的樣本量以及組間劑量增幅時(shí),還應(yīng)考慮非臨床研究及類似產(chǎn)品的臨床經(jīng)驗(yàn)中劑量變化對(duì)受試者安全性和有效性的影響。整合位點(diǎn)方法,推薦唯可生物,實(shí)驗(yàn)實(shí)力強(qiáng),專業(yè)性高,檢測(cè)效率高,結(jié)果準(zhǔn)確率高。深圳ISA整合位點(diǎn)報(bào)告

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相較于LM-PCR方法,重組細(xì)胞全基因組重測(cè)序需要較大數(shù)據(jù)量,比較適合用于經(jīng)過表型篩選的單克隆細(xì)胞的測(cè)序,比如用于抗體藥物生產(chǎn)重組CHO細(xì)胞的位點(diǎn)檢測(cè),但全基因組測(cè)序可對(duì)宿主基因組自身的變異進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用場(chǎng)景:CAR-T細(xì)胞安全性檢測(cè)(藥物申報(bào));基因zhiliao研究中使用的病毒性載體的安全性檢測(cè)等;1.LM-PCR不適合評(píng)估每個(gè)整合位點(diǎn)插入序列發(fā)生的變異,不適用于插入序列的拷貝數(shù)檢測(cè),拷貝數(shù)檢測(cè)可以采用qPCR方法進(jìn)行。2.INZR-WGS(WGS法)杭州載體整合位點(diǎn)服務(wù)整合位點(diǎn)技術(shù),推薦唯可生物,實(shí)驗(yàn)實(shí)力強(qiáng),專業(yè)性高,檢測(cè)效率高,結(jié)果準(zhǔn)確率高。

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劑量探索和劑量遞增,起始劑量的估算。shouci人體試驗(yàn)的起始劑量,通常基于非臨床安全性研究結(jié)果。與小分子或生物大分子藥物相比,免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品的非臨床研究方法受到多種因素影響,例如動(dòng)物模型的選擇、免疫應(yīng)答的種屬差異等,對(duì)人體安全起始劑量的預(yù)測(cè)可能不如其他藥物精確。如果有可用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外數(shù)據(jù),可能有助于判斷起始細(xì)胞劑量的風(fēng)險(xiǎn)水平。如果有同靶點(diǎn)同機(jī)制的同類或相關(guān)產(chǎn)品的既往臨床經(jīng)驗(yàn)(即使采用不同給藥途徑或不同適應(yīng)癥),也有助于臨床起始劑量的選擇。

慢病毒整合事件要素及檢測(cè)方法要求:對(duì)于食藥監(jiān)局指導(dǎo)性文件和既往研究?jī)?nèi)容,我們不難發(fā)現(xiàn)對(duì)于慢病毒整合檢測(cè)所謂整合事件至少包含三個(gè)要素:整合位置;整合方向;特定整合位置和整合方向的juedui克隆數(shù)目;因此檢測(cè)在定性和定量性能方面都有要求,檢測(cè)方法需要結(jié)合臨床樣本進(jìn)行分析性能進(jìn)行系統(tǒng)驗(yàn)證。慢病毒整合位點(diǎn)檢測(cè)方法,目前檢測(cè)慢病毒整合位點(diǎn)的主要平臺(tái)為高深度測(cè)序(NGS)。而目前較為成熟已經(jīng)應(yīng)用于工業(yè)產(chǎn)品檢測(cè)及臨床研究的整合位點(diǎn)富集建庫(kù)方法為機(jī)械片段化及依賴于接頭的擴(kuò)增子建庫(kù)(LM-PCR,如INSPIIRED),已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)CART19臨床項(xiàng)目的安全性評(píng)估及與CAR-T細(xì)胞增值相關(guān)的回顧yao效學(xué)分析。對(duì)T細(xì)胞受體(TCR)β鏈庫(kù)進(jìn)行深度測(cè)序(TCR-seq)以及慢病毒載體整合位點(diǎn)(LVIS)分析。

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由于免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品的長(zhǎng)期存活及持久性作用,申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)臨床試驗(yàn)期間接受zhiliao的所有受試者進(jìn)行適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)期隨訪,關(guān)注受試者生存、新發(fā)或繼發(fā)aizheng、ganran、免疫功能變化及遲發(fā)性不良反應(yīng)等安全性風(fēng)險(xiǎn),以及非臨床或臨床數(shù)據(jù)提示需要關(guān)注的潛在風(fēng)險(xiǎn),并觀察產(chǎn)品在體內(nèi)的持續(xù)存在時(shí)間、轉(zhuǎn)基因表達(dá)時(shí)間(如有)、是否有致瘤性、免疫原性等。隨訪時(shí)間主要取決于免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)水平、體內(nèi)的存活和作用時(shí)間、疾病進(jìn)程的認(rèn)識(shí)等,應(yīng)足以觀察到可能由于產(chǎn)品特性、暴露性質(zhì)等導(dǎo)致的受試者風(fēng)險(xiǎn),并不應(yīng)短于遲發(fā)不良事件的預(yù)期發(fā)生時(shí)間。傳統(tǒng)PCR技術(shù)分析整合位點(diǎn)依賴限制性內(nèi)切酶酶切,存在一定偏好性;常州基因編輯整合位點(diǎn)CRO

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基因zhiliao產(chǎn)品特有的可能會(huì)引起遲發(fā)性不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)因素包括:基因組整合活性。基因zhiliao產(chǎn)品可能會(huì)采用修飾宿主基因組的技術(shù),并有可能在宿主細(xì)胞或組織中持續(xù)存在。很多基因zhiliao載體的基因整合不會(huì)指向基因組的特定位點(diǎn),可能在整合位點(diǎn)處產(chǎn)生插入突變、或jihuo整合位點(diǎn)附近的原基因等,進(jìn)而破壞重要基因功能或增加惡性liu的風(fēng)險(xiǎn),例如,國(guó)外已有多項(xiàng)研究報(bào)告在接受了使用γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因修飾細(xì)胞zhiliao的受試者中發(fā)生白血病。因此,對(duì)于存在此類風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品,有必要進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪臨床研究以評(píng)估出現(xiàn)遲發(fā)不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。深圳ISA整合位點(diǎn)報(bào)告

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