外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經(jīng)水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。此提取方法條件復雜，成本高。廣州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細胞在內(nèi)幾乎所有類型的細胞（免疫細胞、神經(jīng)細胞、干細胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細胞膜受體直接受體細胞，也可運輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細胞器進入受體細胞，參與細胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病天津正規(guī)外泌體提取試劑價格活細胞分泌到胞外的囊泡樣小體，含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)。

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯(lián)系緊密，研究思路可以分為三大類：表達譜、分子標志物和分子機制方向，其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容，短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎(chǔ)之上加入大量樣本驗證，建立ROC、KM曲線，分析分子與臨床疾病的相關(guān)性為主，通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究，顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度，因此工作量通常較大，影響因子通常能夠上10+。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān)

外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。

研究中研究人員發(fā)現(xiàn)，胃病細胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征，并促進胃病細胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導的遷移活動。通過使用質(zhì)譜方法，研究人員確定載脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬細胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì)。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì)，是決定胃病細胞遷移潛力的主要驅(qū)動因素。然而，來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細胞的外泌體在體外和體內(nèi)對胃病細胞的遷移沒有顯著影響。在機制上，M2巨噬細胞衍生的外泌體介導ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路，并在TAM和受體胃病細胞之間進行細胞間轉(zhuǎn)移，促進細胞骨架的遷移。總的來說，該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細胞，促進了胃病細胞的遷移。外泌體提取：小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強地滯留，更慢地被洗脫出。廣州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。廣州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

用于外泌體提取的體液收集注意事項：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因為肝素與引物和/或酶有競爭作用。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合，阻止細胞攝取外泌體。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達莫（CTAD），CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體。EDTA可能會干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇。此外，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或檸檬酸鹽處理后的血液樣本中外泌體的表觀數(shù)量。廣州正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家