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來源: 發布時間:2025-04-18

外泌體提純試劑盒的特色與優勢:純化和富集的完整血漿/血清,尿液和細胞培養基中外泌體的可用于功能研究;樣本輸入量多樣;無需耗時的超速離心,過濾或特殊注射器;無需沉淀試劑,也無需過夜培養;無需蛋白酶處理;適用于多種物種;外泌體被純化并且不含任何其他RNA結合蛋白;可以使用NanoSight®或電子顯微鏡分析純化的外泌體,以評估近似外泌體大小范圍和濃度。外泌體(exosomes)是一種能被機體內大多數細胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質雙層膜的微小膜泡。它普遍存在并分布于各種體液中,攜帶和傳遞重要的信號分子,形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統,影響細胞的生理狀態并與多種疾病的發生與進程密切相關近年來,隨著人們對外泌體的研究和認識加深。珠海外泌體提取試劑廠家直銷

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外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質干細胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。細胞外囊泡是蛋白質、mRNA、miRNA和脂質運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,根據它們的大小和發生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。寧波外泌體提取試劑廠家推薦外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊。

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外泌體的形成與鑒定:首先,細胞膜內陷形成一個杯狀結構,包括細胞表面蛋白和與細胞外環境相關的可溶性蛋白,導致早期胞內體(early-sortingendosome,ESE)的從頭形成,或者是杯狀結構直接和已經存在的ESEs融合;trans-高爾基體和內質網也能協助形成ESEs。ESE成熟后形成晚期胞內體(late-sortingendosomes,LSEs),較終形成MVBs(也稱為多囊內小體)。MVBs是通過endosome限制膜向內凹(即質膜雙凹)形成的,這一過程導致MVBs含有多個ILVs。MVB可以與溶酶體或自噬體融合,較終降解或與質膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白、免疫調節蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內蛋白、RNA、DNA、氨基酸和代謝物。使用可截留100KD分子量的膜,通過離心截留上清中的外泌體,截留完成后

為了分離外泌體,研究人員用兩個這樣的單元串聯構建了一個裝置。首先,使用聲波從血液樣品中除去細胞和血小板。一旦細胞和血小板被去除,樣品進入第二個微流體單元,然后使用較高頻率的聲波將外泌體與稍大的細胞外囊泡分開。這項工作的通訊作者之一,麻省理工學院材料科學與工程系科學家MingDao博士說:“聲波更溫和。而且在分離時,這些囊泡受處理的時間只有1秒鐘或更短。這是一個很大的優勢。”使用該設備,處理100微升未稀釋血液樣本只需要不到25分鐘。“這種新技術可以解決當前外泌體分離技術的缺點,如周期長,一致性差,產量低,污染以及完整性受損等。我們想要把提取高質量的外泌體的過程簡化為按一個按鈕就在10分鐘內獲得所需樣品一樣簡單。”研究人員們說。來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。

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外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白(CD63,CD9,CD81等)進行Westernblot檢測,可以鑒定所提的外泌體。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。外泌體作為內源性的天然藥物載體有著獨特的優勢,表面由脂質和蛋白質組成。唐山正規外泌體提取試劑直銷價

靜置10~15分鐘,留取沉淀物備用。珠海外泌體提取試劑廠家直銷

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Millipore)濃縮至5mL,將濃縮液重新以10倍PBS稀釋后4℃超速離心100000×g(角轉子TYPE50.2)4h,收集離心管底部約1mL液體及極微量沉淀(來自2×107個細胞)以20mLPBS重懸即為胞外體,用0.22μm過濾膜除菌后凍存于-80℃備用。(該步驟參考文獻“腫瘤細胞來源胞外體的分離鑒定與功能檢測”)優點是:分離得到的外泌體純度很高。缺點是:步驟繁瑣、耗時耗力、對離心時不好把握。珠海外泌體提取試劑廠家直銷

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