生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無菌的環境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構。整個操作請于冰上進行,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。金華正規鼠尾膠原服務電話
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細胞原代培養中的應用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學的研究領域中已得到的限翩,否則培養成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養層,提高了培養細胞的材料和方法r1]實驗材料:培養液DEIdE(G皿}ao),表皮細胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細胞培養皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細胞的分離和細胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細胞懸液,加入細胞培養液.用梯度離心收集細胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻c13o(4)培養皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。南京正規鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質。
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調節pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調節PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產品經進一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。
細胞培養過程中,細胞需要貼附在培養皿表面(懸浮培養細胞除外)才能完成生長過程,而有一些細胞卻總是不太給力,自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難,這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層(coating),給培養皿涂上了一層膠原蛋白后,細胞就能更好地貼附上去,除了培養皿,一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養得細胞,同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協助細胞貼壁生長。耗子尾汁還能變得更加,一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴,制作過程需要經歷醋酸抽提鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠。
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學強度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-PAGE,結果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對分子質量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進行TEM和電子衍射觀察。鼠尾膠原醋酸溶解:不建議用過濾的方法無菌化。濟南鼠尾膠原價格
用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。金華正規鼠尾膠原服務電話
膠原蛋白的應用:1.膠原天然的緊密的纖維結構,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發現具有這品質;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團.所以與水結合的能力很強.這一性質使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質中膨脹,這一性質也應用于制備膠原基材料的處理工藝中。金華正規鼠尾膠原服務電話