培養基配制:素:為防止培養時期細菌的污染,可在培養基中添加適當素,一般用量與組織細胞培養相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質起凝集作用。PHA的細胞數隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。培養酵母菌一般用麥芽汁培養基,培養霉菌則一般用查氏合成培養基。山西培養基制備器廠家
培養基的購置:從培養基自身的質量來看,不同生產廠家的產品,甚至同一廠家不同批號的產品都會存在差異。對培養基的供應企業進行評價后選擇合格的供應商,這是培養基購買過程中重要的步驟。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業;企業是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。要求生產企業提供:培養基成分名稱及產品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術數據清單、質控證書以及必要的安全/危害數據等材料。山西培養基制備器廠家培養基制備器真彩色液晶屏顯示,觸摸屏加按鍵操作。
培養基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源(生長因子)等。(1)碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如CO2、NaHCO3等無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養微生物只能利用有機碳源。單質碳不能作為碳源。(2)氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如N2、NH3、NO3-、NH4+(無機氮源)蛋白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培養基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養物質以及氧氣的要求。例如,培養乳酸桿菌時需要在培養基中添加維生素,培養霉菌時須將培養基的pH調至酸性,培養細菌是需要將pH調至中性或微堿性,培養厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。
簡單制作培養基,需要完成以下幾個主要步驟:需要選擇培養基配方,同一種培養基,其表達方式往往存在著差異。所以,除了應當嚴格按照標準方法的規定編制之外,我們一般應盡可能收集有關數據,加以比較和核對,然后根據自己的目的選擇和記錄數據來源。需記錄培養基的制備,培養基的制備記錄包括培養基的名稱、配方及其來源、pH值、滅菌溫度、時間、配制日期、制備人等,并且要復印記錄和保存原始記錄備查。對副本的記錄應該和培養基一起保存,以防出現混亂。需稱重培養基的成分,培養基成分要準確稱量,并注意防止混淆。每一種成分稱量完畢后,都要在分裝的一面打上記號,然后將分裝的藥物一起放在左邊。每一個成分稱量完之后,都會向右移動。全部稱量完畢,應再次檢查。制備培養基的操作要點:固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。
培養基質量測試:(1)澄清度:水是細胞培養基的溶劑。細胞培養基中的營養成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養基是否溶解以及培養液是否透明澄清直接影響培養基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養基的澄清度檢查,判斷細胞培養基的澄清度。按中國藥典2005年版二部附錄ⅨB進行。(2)pH值:哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養基的批間差。清大天一標準規定取規定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培養基溶液pH值相近的兩點標準緩沖液校準后的酸度計進行測定。按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國藥典2005年版二部附錄ⅥH進行。培養基制備器不要過早打開滅菌鍋,要等滅菌鍋內氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。河北自動攪拌培養基制備器
培養基是生物制品領域中常用的物質,在細菌和細胞培養中十分必要。山西培養基制備器廠家
液體培養基:為確定液體培養基的生長率,應接種適當的培養物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養后,計數或計算液體培養基分數而得出其生長數量的。對于液體培養基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實現。目標菌和非目標菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養基10mL/管待檢。接種目標菌:將少量測試菌株培養物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。接種非目標菌:將大量測試菌株培養物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。山西培養基制備器廠家