培養基的實驗室制備:―般要求:正確制備培養基是微生物檢驗的好基礎步驟之一,使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性。中國香港培養基制備器
血清培養基主要問題:血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。動物個體不同,血清產地、批號不同,每批質量差異甚大,其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。大規模生產中,血清來源越來越困難,價格昂貴,是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。北京進口培養基制備器使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。
制作斜面培養基和平板培養基:培養基滅菌后,如制作斜面培養基和平板培養基,須趁培養基未凝固時進行。(1)制作斜面培養基。在實驗臺上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右,將試管頭部枕在木條上,使管內培養基自然傾斜,凝固后即成斜面培養基。(2)制作平板培養基。將剛剛滅過菌的盛有培養基的錐形瓶和培養皿放在實驗臺上,點燃酒精燈,右手托起錐形瓶瓶底,左手拔下棉塞,將瓶口在酒精燈上稍加灼燒,左手打開培養皿蓋,右手迅速將培養基倒入培養皿中,每皿約倒入10毫升,以鋪滿皿底為度。鋪放培養基后放置15分鐘左右,待培養基凝固后,再5個培養皿一疊,倒置過來,平放在恒溫箱里,24小時后檢查,如培養基末長雜菌,即可用來培養微生物。
微生物培養基:根據微生物類型和培養基的組成,微生物培養基通常可以分為:限定培養基、復雜培養基、選擇性培養基和富集培養基。在確定的培養基中,確切的化學成分是已知的。這些類型的培養基通常由純生化物質組成,通常用于研究微生物的較低營養需求。相比之下,復雜介質的確切化學成分尚不清楚。復雜介質培養基類型通常包含生物來源的試劑,例如酵母提取物和蛋白胨,其中確切的化學成分未知。復雜培養基通常提供多種生長因子,有助于未知和挑剔的細菌物種的培養。培養基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。
一種培養基制備分裝一體機,其中所述自動分裝系統包括一圓形轉盤,所述圓形轉盤上設有多個沿圓周方向均勻間隔設置的凹槽,所述凹槽內設有培養皿,所述圓形轉盤上方還設有隨該圓形轉盤一起轉動的玻璃護蓋,所述出料管的出口段定位于所述玻璃護蓋與所述培養皿之間,出料管的出口與培養皿對應。地,上述的一種培養基制備分裝一體機,其中所述加熱元件為電熱管,該電熱管內設有電熱絲。地,上述的一種培養基制備分裝一體機,其中所述加熱元件為電熱膜,該電熱膜由內向外依次包括覆蓋連接于所述容腔底部壁體上的內絕緣層,厚膜電路層和外絕緣層。培養基制備器全自動控制程序,確保內部溫度均一。北京進口培養基制備器
培養基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。中國香港培養基制備器
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。中國香港培養基制備器