培養基配制--容器和水:配制培養基所用的容器不得影響培養基質量,一般為玻璃容器,培養基配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質殘留。在大體積配制培養基時,企業也可根據自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋,且容器應潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。培養基用水是培養基制備過程中非常重要的一個物質。不可以使用自來水,自來水中的雜質可能會對檢驗結果有一定的影響。許多法規在培養基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優,所以不必單獨制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應按藥典的要求定期進行檢測。培養基的分裝:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。甘肅瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基:是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基的種類:培養基種類很多,根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基;根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等;根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、菌培養基等。河南培養基制備器安裝調試培養基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。
培養基制備技術:一、玻璃器皿的清洗:在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。培養基制備器具有液量分配,時間分配,復制分配三種工作模式。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當中'海培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。全自動培養基制備分裝系統:運行過程順滑無聲;大程度的削減了噪音。河北實驗室培養基制備器
全自動培養基制備儀主要特點:高質量制備各種類型培養基。甘肅瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基中血清的質量標準:血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求:牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。對細胞有良好的支持繁殖作用。甘肅瓊脂滅菌 培養基制備器