固體斜面培養基配制:培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。理想設備應在10~15分鐘內達到121°C(如高壓滅菌鍋)或快速溶解瓊脂(如帶攪拌的培養基制備儀)。寧夏Systec培養基制備器
配制培養基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養物,培養基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產生沉淀。為了防止這類沉淀發生,可將這些物質分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡合物,防止沉淀的產生。高壓蒸汽滅菌一般使培養基pH降低,應在配制培養基時加以調節。四川瓊脂滅菌 培養基制備器運行噪音增大需潤滑軸承或緊固松動部件。
微生物檢驗培養基制備的要點:稱取數量,用1/100的電子天平稱出培養基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養基需要各成分的數量,然后用電子天平準確稱取重量(將稱量紙折疊成簸箕盛藥)。培養基過濾,如果對配制的培養基沒有特殊要求,這一步可以省略。中'海培養基如有渾濁和沉淀現象,可將需要澄清的液體培養基用油紙過濾。固體介質可以用雙層紗布過濾,中間有一層薄薄的脫脂棉。如果過濾法不能滿足澄清要求,可以采用蛋清澄清法,即將培養基加熱冷卻至五十度至六十度,不超過三角瓶一半的容量。每一千毫升放入1~2個蛋清,用力搖晃三至五分鐘,用121℃高壓蒸汽滅菌二十分鐘,趁熱取出過濾。
購買的培養基到貨后,應有專人做好接受和驗收工作,應仔細核對生產企業提供的資料、培養基名稱、規格數量、外觀特征、批號、保質期是否符合要求。每批培養基到貨后都應對培養基的質量進行檢測,滿足檢測方法規定的要求后方可投入使用。培養基的儲存:干粉培養基應保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;未開瓶的培養基在室溫下的保存期限以廠家提供為準,開瓶后的干粉培養基易吸濕,應注意防潮并盡快用完。應定期對儲存中的培養基進行常規檢查,如容器密閉性復查、開封日期、內容物的感官檢查,如果培養基發生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。冷卻過程中需確保密閉性(如帶無菌過濾膜的通風口),避免污染。
培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。**小規模實驗室**:選擇帶高效加熱/冷卻功能的臺式培養基制備儀。湖北瓊脂培養基制備器
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培養基的制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節信息,如;培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。寧夏Systec培養基制備器