培養基的使用:1.瓊脂培養基的融化:將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節省時間和成本。中國香港自動攪拌培養基制備器
培養基是生物制品領域中常用的物質,在細菌和細胞培養中十分必要,但是現有技術中有些培養基的某種組份容易分解,造成保存時間短等問題,導致培養基的使用成本十分高。其中,在動物培養基中,谷氨酰胺是一種必要的組份,但是在常溫下,很短的時間內,約7-10日中培養基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,這給其商品化帶來很大的困難。這樣的培養基在現有技術中很多,都具有上述的缺陷,例如,中國CN1087778C公開了一種雜交瘤細胞的無血清培養基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是這種培養基的保存時間十分有限,很難達到商業使用的目的。中國香港自動攪拌培養基制備器**蒸汽加熱**(高壓滅菌鍋):需關注蒸汽生成速度及均勻性。
培養基的配置應該注意的幾大步驟:常用玻璃儀器的準備制備培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內,于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干,備用。(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(3)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內的氣體污染),然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內,于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干,備用。其他玻璃器皿均應按上法處理,也應裝金屬筒內160℃干熱滅菌2h后,備用。
培養基制備的基本方法:1.培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對。2、培養基的制備記錄,每次制備培養基均應有記錄,包括培養推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份。3.培養基成分的稱取。培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤龋糠Q完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。5、培養塞pH的初步調整培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正。緊急停止鍵卡滯可用酒精清潔觸點。
培養基中血清的質量標準:血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定?!队脛游锛毎w外培養生產生物制品規程》中的要求:牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。對細胞有良好的支持繁殖作用。應用于疫苗研發領域時能確保培養基無菌要求。 精確計時功能避免過度滅菌導致的營養流失。中國香港自動攪拌培養基制備器
高效加熱和冷卻能力是培養基制備器的重要性能,直接關聯滅菌可靠性、培養基質量及實驗效率。中國香港自動攪拌培養基制備器
培養基的實驗室制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數據,如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節信息,如;培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。中國香港自動攪拌培養基制備器