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離體多光子顯微鏡峰值功率密度

來源: 發布時間:2024-03-11

當激光光束焦點的位置在鏡面上,此時被反射的激光在無限空間中成為準直光束,并在OBJ2的焦平面上形成了一個激光光斑。同理,如果橫向掃描光束,則會形成遠離傾斜鏡鏡面的焦點,這又導致返回的光束會聚或發散,進而OBJ2能在軸向不同位置形成焦點,通過這種方式即能實現連續的軸向掃描。對于較小的傾斜角,聚焦沒有球差。該組在實驗中表征了這種將橫向掃描轉換為軸向掃描技術的光學性能,并使用它將光片顯微鏡的成像速度提升了一個數量級,從而可以在三個維度上量化快速的囊泡動力學。該組還演示了使用雙光子光柵掃描顯微鏡以12 kHz進行共振遠程聚焦,該技術可對大腦組織和斑馬魚心臟動力學進行快速成像,并具有衍射極限的分辨率。光子顯微鏡利用光學透鏡和光學元件將樣品中的光反射或透射到目鏡中,從而形成圖像。離體多光子顯微鏡峰值功率密度

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對于雙光子成像而言,離焦和近表面熒光激發是兩個比較大的深度限制因素,而對于三光子(3P)成像這兩個問題大大減小,但是三光子成像由于熒光團的吸收截面比2P要小得多,所以需要更高數量級的脈沖能量才能獲得與2P激發的相同強度的熒光信號。功能性3P顯微鏡比結構性3P顯微鏡的要求更高,它需要更快速的掃描,以便及時采樣神經元活動;需要更高的脈沖能量,以便在每個像素停留時間內收集足夠的信號。復雜的行為通常涉及到大型的大腦神經網絡,該網絡既具有局部的連接又具有遠程的連接。要想將神經元活動與行為聯系起來,需要同時監控非常龐大且分布普遍的神經元的活動,大腦中的神經網絡會在幾十毫秒內處理傳入的刺激,要想了解這種快速的神經元動力學,就需要MPM具備對神經元進行快速成像的能力。快速MPM方法可分為單束掃描技術和多束掃描技術。Ultima Investigator多光子顯微鏡設備精確觀測生物分子相互作用,多光子顯微鏡推動生命科學研究發展。

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繼首代小型化雙光子顯微鏡在國際上獲得小鼠自由行為過程中大腦神經元和突觸的動態圖像后,我們成功研制了第二代小型化雙光子顯微鏡。它具有更大的成像視野和三維成像能力,可以清晰穩定地對自由活動小鼠三維腦區的數千個神經元進行成像,實現對同一批神經元的一個月追蹤記錄。通過對微光學系統的重新設計系統的。微物鏡工作距離延長至1mm,實現無創成像。內嵌可拆卸的快速軸向掃描模塊,可采集深度180微米的3D體成像和多平面快速切換的實時成像。該掃描模塊由一個快速的電動變焦透鏡和一對中繼透鏡組成,在不同深度成像時可保持放大倍率恒定。其變焦模塊重量,研究人員可根據實驗需求自由拆卸。此外,新版微型化成像探頭可整體即時拔插,極大地簡化了實驗操作,避免了長周期實驗時對動物的干擾。在重復裝卸探頭同一批神經元時,視場旋轉角小于,邊界偏差小于35微米。

多光子顯微鏡對成像深度的改善利用紅光或紅外光激發,光散射小(小粒子的散射與波長的四次方的成反比)。不需要***,能更多收集來自成像截面的散射光子。***不能區分由離焦區域或焦點區發射出的散射光子,多光子在深層成像信噪比好。單光子激發所用的紫外或可見光在光束到達焦平面之前易被樣品吸收而衰減,不易對深層激發。多光子熒光成像的特點。深度成像∶與共聚焦相比能更好地對厚散射物質成像。信噪比∶多光子吸收采用的波長是單光子吸收的2倍以上,所以顯微試樣中的瑞利散射更小,熒光測定的信噪比更高。觀察活細胞∶離子測量(i.e.Ca2+),GFP,發育生物學等—減少了光毒性和光漂白,能對細胞長時間觀察。滔博生物-三維顯微鏡-適用于各行各業的觀察需求!

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作為一個多學科、知識密集型和資金密集型的高科技產業,多光子顯微鏡涉及醫學、生物學、化學、物理學、電子學、工程學等多個學科。其生產工藝相對復雜,進入門檻較高。它是衡量一個國家制造業和高科技發展水平的重要標準之一。在過去的五年里,多光子顯微鏡的市場是集中的。由于投產成本高,技術難度大,目前涌現的新企業并不多。顯微鏡作為傳統的高科技產業,并沒有被其他技術顛覆,而是一直在不斷融合發展相關技術,在醫療等精密檢測領域發揮更大的作用。顯微鏡的商業化發展已進入成熟階段,主要需求來自教學、生命科學研究和精密測試等。全球市場呈現溫和增長趨勢。而顯微鏡產品(如多光子顯微鏡、電子顯微鏡)正在刺激市場需求,多光子顯微鏡市場發展潛力巨大。多光子顯微鏡是一種用于生物學領域的分析儀器。靈長類多光子顯微鏡原理

多光子顯微鏡是一種高分辨率的顯微鏡技術,利用多光子激發熒光的原理來觀察生物樣品的細胞結構和功能。離體多光子顯微鏡峰值功率密度

細胞在受到外界刺激時,隨著刺激時間的增長,即使刺激繼續存在,Ca2+熒光信號不但不會繼續增強,反而會減弱,直至恢復到未加刺激物時的水平。對于細胞受精過程中Ca2+熒光信號的變化情況,研究發現,配了在粘著過程中,Ca2+熒光信號未發生任何變化,而配子之間發生融合作用時,Ca2+熒光信號強度卻會出現一個不穩定的峰值,并可持續幾分鐘。這些現象,對研究受精發育的早期信號及Ca2+在卵細胞和受精卵的發育過程中的作用具有重要的意義。在其它一些生理過程如細胞分裂、胞吐作用等,Ca2+熒光信號強度也會發生很的變化。離體多光子顯微鏡峰值功率密度

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