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Seahorse細(xì)胞能量代謝分析儀哪家正規(guī)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-24

流式細(xì)胞術(shù)為一種生物學(xué)技術(shù),計(jì)數(shù)和分選懸浮于流體中的微小顆粒是它的主要用途。這種技術(shù)能夠用來(lái)連續(xù)的多參數(shù)的分析流過(guò)光學(xué)或電子檢測(cè)器的一個(gè)個(gè)細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)(FlowCytoMetry,F(xiàn)CM)是通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記的熒光信號(hào)使高速、逐一的定量分析和分選懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子得以實(shí)現(xiàn)的技術(shù)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則有哪些呢?將紅細(xì)胞去除的方法:紅細(xì)胞裂解法,有著簡(jiǎn)單的操作,比較快的速度,并且使原始標(biāo)本的白細(xì)胞分布盡可能保持。建議在染色后溶血。若需要在染色前溶血,則應(yīng)當(dāng)確保:溶血過(guò)程中不能改變抗原性。徹底洗去溶血?jiǎng)瑳](méi)有影響到細(xì)胞和抗體結(jié)合的動(dòng)力反應(yīng)。固定劑不包含在所用的溶血?jiǎng)┲校蝗粫?huì)對(duì)細(xì)胞活性及表面標(biāo)記結(jié)果產(chǎn)生影響。密度梯度離心法,能夠比較好的回收靶細(xì)胞,并且可能得到富集,同時(shí)將紅細(xì)胞、碎片等去除。細(xì)胞分析儀非常適合進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞熒光檢測(cè)、單個(gè)細(xì)胞質(zhì)量控制、單個(gè)細(xì)胞精確鑒定等操作。Seahorse細(xì)胞能量代謝分析儀哪家正規(guī)

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近20年來(lái),隨著流式細(xì)胞儀及其檢測(cè)技術(shù)的日臻完善,人們?cè)絹?lái)越致力于樣品制備、細(xì)胞標(biāo)記、軟件開(kāi)發(fā)等方面的工作,以擴(kuò)大流式細(xì)胞儀的應(yīng)用領(lǐng)域和使用效果。流式細(xì)胞儀可以分成三個(gè)基本的結(jié)構(gòu),這三個(gè)基本的結(jié)構(gòu)已經(jīng)形成了完善的系統(tǒng),分別是光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、液流系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀借助了激光的原理,通過(guò)單克隆抗體和熒光染料的結(jié)合使用,并且結(jié)合了計(jì)算機(jī)技術(shù),從而可以對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過(guò)發(fā)送參數(shù)信號(hào)的方式,確保檢測(cè)效率的提升,而且激發(fā)效率和單色性可以得到保障,在統(tǒng)計(jì)分析的過(guò)程中,各類(lèi)數(shù)據(jù)都非常的精確,在檢測(cè)的過(guò)程中靈敏度和特異性都能得到保障。Seahorse細(xì)胞能量代謝分析儀哪家正規(guī)細(xì)胞分析儀通常能夠?qū)?xì)胞的熒光顯微痕跡、單細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞質(zhì)染色體等進(jìn)行分析。

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流式細(xì)胞儀的信號(hào)處理系統(tǒng):熒光信號(hào)的強(qiáng)度表示了所測(cè)細(xì)胞核內(nèi)DNA的含量及倍體,經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào),再通過(guò)模/數(shù)轉(zhuǎn)換器,將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)。計(jì)算機(jī)把所測(cè)量到的各種信號(hào)進(jìn)行處理,將分析結(jié)果顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上,也可以打印出來(lái),或者以數(shù)據(jù)文件的形式存儲(chǔ)在硬盤(pán)上,以備日后查詢或分析。流式細(xì)胞儀還可以根據(jù)所規(guī)定的參量把指定的細(xì)胞亞群從整個(gè)群體中分選出來(lái),以便對(duì)它們進(jìn)行進(jìn)一步的研究分析。

死細(xì)胞利用PI、7-AAD或EMA進(jìn)行染色,這些染料不能夠?qū)罴?xì)胞進(jìn)行染色。能夠同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志和活性分析為這個(gè)方法的優(yōu)勢(shì)。尤其適用于高度壞死的樣本。Z常用的是7-AAD,由于在488nm激發(fā)下,670nm左右為其Z大發(fā)射光,與FITC或PE進(jìn)行多色標(biāo)記非常適合。但是隨著時(shí)間延長(zhǎng),在固定的細(xì)胞群體,會(huì)重新分配7-AAD,很難區(qū)分死活細(xì)胞。因此,EMA,對(duì)于染色并在固定后12小時(shí)以上分析的標(biāo)本是Z好的選擇。EMA與死細(xì)胞DNA穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合使長(zhǎng)時(shí)間固定后仍能很好地區(qū)分固定前的死活狀態(tài)得以保證。細(xì)胞分析儀可檢測(cè)細(xì)胞種群所特有的特定熒光信號(hào),可以頻繁地瞬間感知、快速采集所需要的數(shù)據(jù)。

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我們與BakerCorporation合作開(kāi)發(fā)出用于CytoFLEXSRT細(xì)胞分選儀的SterilGARD。這是專(zhuān)門(mén)為CytoFLEXSRT設(shè)計(jì)的二級(jí)生物安全柜,經(jīng)驗(yàn)證符合人員和產(chǎn)品保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)。它包括一個(gè)氣溶膠排除系統(tǒng)。總體擁有成本(totalcostofownership)用于計(jì)算技術(shù)產(chǎn)品或服務(wù)的購(gòu)買(mǎi)成本及其有效期內(nèi)的經(jīng)營(yíng)成本。評(píng)估技術(shù)成本很重要,因?yàn)檫@些成本并非總是反映在前期定價(jià)中。作為當(dāng)今全球較強(qiáng)的流式分選系統(tǒng),MoFlo較早建立了流式分選的金標(biāo)準(zhǔn)-空氣中激發(fā)和分選,它為推動(dòng)細(xì)胞分選在科學(xué)界的應(yīng)用做出了杰出貢獻(xiàn),在全球科學(xué)家中獨(dú)享盛譽(yù)。MoFlo系列流式細(xì)胞分選儀可運(yùn)對(duì)各種真核和原核細(xì)胞、植物細(xì)胞、微生物、浮游生物等進(jìn)行檢測(cè)及分選。專(zhuān)為要求高產(chǎn)量、生物安全性和需要便捷的軟件分析系統(tǒng)的研究者而設(shè)計(jì)。細(xì)胞分析儀可以使用多種細(xì)胞的樣本,如細(xì)胞懸浮液、過(guò)濾篩、細(xì)胞混合物等。湖北BioTek酶標(biāo)儀

細(xì)胞分析儀可以準(zhǔn)確識(shí)別極度稀有的細(xì)胞,如干細(xì)胞、白血病細(xì)胞等。Seahorse細(xì)胞能量代謝分析儀哪家正規(guī)

以前的流式細(xì)胞儀,在分析細(xì)胞樣品時(shí),CV值只能達(dá)到5%~7%左右,前向角散射光分辨率只為0.3μm。流式細(xì)胞儀前向角散射光的分辨率已達(dá)到0.02μm。流式細(xì)胞儀的電信號(hào)脈沖通道,從當(dāng)初的128道→256道→1024道,直到目前一般已達(dá)到40%道,有的甚至還可以達(dá)到5120道。信號(hào)脈沖通道數(shù)分布越多,對(duì)細(xì)胞的分辨率就越高,對(duì)細(xì)胞的分析就越精確。例如,目前,各流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀,都能以高精確度來(lái)分析人類(lèi)染色體的畸變,通過(guò)二維圖顯示擴(kuò)展群體分布,極大地提高了流式細(xì)胞儀的分辨率。另外,通過(guò)對(duì)脈沖系統(tǒng)功能的改進(jìn),也提高了細(xì)胞參數(shù)分析的質(zhì)量。Seahorse細(xì)胞能量代謝分析儀哪家正規(guī)

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