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來源: 發(fā)布時間:2022-03-10

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不過也有用單抗做檢測抗體的情況,尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢,但該法只適用于有多個結合位點的抗原檢測,主要用于檢測各種大分子抗原——例如在醫(yī)學檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關的,以及在科研中檢測細胞因子等。

由于雙抗體夾心法特異性高,在檢測過程中有時會將樣本和酶標抗體同時加入進行反應,稱為雙抗體夾心一步法,因為操作時間短,在商業(yè)化生產中有很大優(yōu)勢。

但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應(hook ffect),因為此時如果樣本中抗原含量過高會導致其與固相抗體和酶標抗體均有結合而無法形成“夾心復合物”,此時測出的結果將低于實際含量甚至是陰性結果。

因此,如果使用雙抗體夾心一步法測定樣本中抗原含量時要注意測量的線性范圍,另外使用高親和力的單抗也可削弱鉤狀效應。

測定試劑空白吸光度變化(ΔA/min),用來檢查試劑在工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性。但事實上,試劑空白吸光度變化速率無法反映試劑盒的穩(wěn)定性,試劑空白吸光度變化速率主要反映干擾程度和儀器的穩(wěn)定性。用吸光度差值(ΔA)或吸光度變化(ΔA/min)來表示單位濃度的被測物反應所引起的信號變化,其含義類似摩爾消光系數(shù),應符合生產企業(yè)給定范圍。需要注意的是,分析靈敏度不是越高越好,以適合待測物檢測范圍為原則。分析靈敏度一般用于批間比較,較能反映制造商的配方、原料的一致性。 想要購買試劑盒服務 ,歡迎咨詢中喬新舟了解!

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