在細胞實驗中，通過原代分離實驗得到的原代細胞，與永生化的細胞系相比，能夠忠實模擬體內生理狀態和功能，屬于“高階”的細胞模型，但是獲得高純度的原代細胞是一個非常艱巨的過程，科學合理的原代細胞提取和培養方法對于任何實驗室都是一筆不可多得的財富。上次小編整理了脂肪原代細胞提取的教程，得到了大家的一致好評。應廣大讀者要求，小編快馬加鞭“肝”出了小鼠原代肝細胞的提取“密鑰”，趕緊收好~肝臟是人體“”代謝，在包括葡萄糖、蛋白質和脂肪等多種物質代謝過程中發揮重要作用。肝臟參與多種生理病理過程，與、、糖尿病等代謝性疾病密切相關。肝臟中的細胞主要分為實質細胞和非實質細胞兩類：實質細胞的占比達到整個肝臟的70%-80%，包括肝細胞和少量的膽管內皮細胞；非實質細胞包括星狀細胞，巨噬細胞，NK細胞，成纖維細胞等。肝原代細胞提取培養的主要是肝細胞。 原代肝細胞的定制尺寸。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！內蒙古比格犬原代肝細胞種類
原代肝細胞屬于高度分化的細胞，對體外培養條件的要求比傳代細胞高，其在體外存活時間也比傳代細胞短，采用單層膠原培養法進行體外培養的原代肝細胞存活時間為1周左右[25]。本實驗是在Seglen兩步灌流法的基礎上進行改進，結合逆向灌流、多次低速離心等方法成功分離獲取活率高、純度高的原代肝細胞，且體外存活時間可達1周，與文獻[25]報道一致。體外培養48h后給予不同濃度的FFA混合物(油酸∶棕櫚酸=2∶1)進行誘導，誘導24h后油紅O染色顯示肝細胞內有脂滴沉積，肝細胞內TG含量增加，且隨著FFA濃度升高而增加，成功構建了肝脂肪變性細胞模型。本方法操作簡單、時間短、成功率高，因此具有廣泛應用價值。內蒙古比格犬原代肝細胞種類上海中喬新舟 原代肝細胞值得推薦。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！
肝臟原位灌注法：（為分離肝細胞的經典方法）1，在38度-39度的水浴槽中預熱hepes緩沖液和膠原酶液，使其在肝內達到37度。2，給大鼠（180-200g）腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g，從古靜脈注射肝素1000u，打開腹腔，在門靜脈的肝外5mm處松松的放一個結扎線環，將血管套管插入至肝掌，結扎，快速切開肝下血管與面壓力過高，關注500ml無鈣hepes緩沖液，流速為30ml/min，數秒鐘肝臟即變白。3，灌注300ml膠原酶液，流速15ml/min，持續20min。肝臟腫大。4，切下肝臟。用hepes緩沖液沖洗。切開肝纖維囊，收集消化清洗液被并混入100mlleibovitzL15培養液，該懸液含大量肝細胞。5，用兩層紗布或60-80um尼龍篩過濾細胞懸液，靜置，使活細胞沉降20分，室溫下，去除含組織碎屑和死細胞的上清液。6，低速離心法清洗細胞50g40s三次以去除膠原酶，破壞的細胞以及肺肝實質來源的細胞。7，將細胞收集在培養液F12中（含，10ug/ml牛胰島素，），co2孵箱內培養。8，傳代培養：細胞長滿時，先用BSS洗1-2次，再用1：1的，吸除消化液，輕輕洗細胞層，加適量培養液，用吸管吹打成細胞懸液，接種培養。通常從一個大鼠肝中可獲得4*10‘6-6*10’6個活細胞。
原代肝細胞培養基由補充了適當的生長因子和細胞因子的基礎培養基組成。細胞在細胞培養箱中生長并維持在適當的溫度和混合氣體中（對于哺乳動物細胞，通常為37°C，5％CO2）。培養條件根據細胞類型而廣變化。生長培養基的pH，葡萄糖濃度，生長因子和其他營養物質的存在可能會有所不同，具體取決于細胞類型。在建立原代培養過程中，必須在生長培養基中加入以抑制從宿主組織引入的污染。可能包括慶大霉素，青霉素，鏈霉素和兩性霉素B的混合物。但是，不建議長期使用，因為某些試劑（例如兩性霉素B）從長期來看可能對細胞有毒。 上海中喬新舟告訴您 原代肝細胞的選擇方法。歡迎來電咨詢上海中喬新舟！
生物醫學實驗中常常會用到細胞系，因為它們可以快速生長和擴增提供實驗分析要用到的細胞。細胞系與新分離的或原代細胞的培養條件相類似，但也有一些基本不同的地方：（1）每個細胞系需要其特定的生長因子混合物。（2）與原代細胞相比，它們的生長需要更嚴密的監測，因為使它們無限生長的突變同時也會造成它們很快達到過度生長。因此，當細胞系生長到了幾乎覆蓋整個培養器皿底部，也就是90%的密度時，細胞需要重懸洗滌用于實驗或凍存以備將來使用，或者重新接種到新的培養器皿進一步擴增。細胞傳代或續代培養是將細胞從現有的培養物分開或分出來開始新的培養，并加入新鮮培養液來促進擴增的常用手段。盡管它的概念本身相對簡單，本短片中我們將討論能成功保存和擴增細胞系的一些更重要的步驟。 原代肝細胞哪個性價比高？上海中喬新舟告訴您。貴州小鼠心肌原代肝細胞特點
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肝臟表面有一薄層致密的結締組織構成的被膜。被膜深入肝內形成網狀支架，將肝實質分隔為許多具有相似形態和相同功能的基本單位，稱為肝小葉。人類肝臟約有50萬個肝小葉。肝小葉呈多角棱柱體，約l毫米×2毫米大小，小葉的中軸貫穿一條靜脈，為靜脈。肝細胞以靜脈為中心呈放射狀排列，形成肝細胞索。肝細胞索相互吻合成網，網眼間有竇狀隙和血竇。肝細胞間的管狀間隙形成毛細膽管。因此可以說，肝小葉是由肝細胞、毛細膽管、血竇和相當于毛細淋巴管的竇周隙(狄氏間隙)所組成。內蒙古比格犬原代肝細胞種類
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1、原代細胞：ScienCell（中國區正規一級代理）人源和動物源各種原代細胞。
2、培養基：原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養基。
3、細胞培養試劑：胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系（株）：種類豐富（1000余種），已通過STR鑒定；提供細胞株完全培養基。
5、自研產品：支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務：綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩轉株的構建，細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。