基本概念 體外培養(in vitro culture),就是將結構成分或活的個體從體內或其寄生體內取出,放在類似于體內生存環境的體外環境中,讓其生長和發育的方法。組織培養:是指從生物體內取出活的組織(多指組織塊)在體外進行培養的方法。細胞培養:是指將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養的方法。器培養:是指從生物體內取出的器(一般是胚胎器)、器的一部分或器原基在體外進行培養的方法。在無菌環境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養器血中,這一過程稱為取材。
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目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外,血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌素等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養基混合使用,使用濃度一般為5~20 %,常用是10 %。
將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養,則直接將組織塊接入培養器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養基。為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養基,以一定的冷卻速度凍存,保存于液氮中。在極低的溫度下,細胞保存的時間幾乎是無限的。復蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內迅速融解。然后將細胞轉入培養器皿中進行培養。 中喬新舟可供應品質細胞培養試劑 歡迎咨詢。
實驗操作者可以從不同的渠道獲得動物細胞系(通過原代細胞建立培養細胞系,或者從細胞庫直接購買已經建立的細胞系)。選擇符合實驗要求以及高質量的細胞系,以增加成功實驗的機會。在選擇細胞系時有一些標準需要考慮其中包括:細胞的種類、細胞的功能特性、細胞的生長條件和特性。貼壁細胞在培養時必須有可以貼附的支撐物表面(如培養瓶、培養皿的底面)。培養的細胞依靠自身分泌的細胞外基質與其表面表達的或培養基中的黏附因子相結合進行增殖。因為細胞是否貼壁與細胞本身分泌細胞外基質的能力和其本身表達黏附因子的數量相關,因此需要提前檢查所使用的細胞系的規格,以確定是否需要這種類型的培養。 中喬新舟供應細胞培養試劑 ,歡迎您的來電!蘇州hips細胞培養試劑初細胞培養
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酚紅在培養基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響,可以通過純化技術去除,但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用,(特別是雌激)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。 浙江HMSC-ad細胞培養試劑多少錢
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