熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產生生物發光的酶的統稱,其中*有代表性的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究。熒光素酶的具體應用,主要有以下兩個方面:(一):pGL3-Basic---用于轉錄因子結合位點與啟動子活性分析。把待分析啟動子區段構建到F-Luciferase上游,和轉錄因子共轉染分析F-Luciferase活性即可反應啟動子的活性高低。該質粒通常需要結合持續性表達R-Luciferase的載體作為內參以校正不同樣品之間轉染的轉染效率。(二):psiCHECK2---miRNA與其靶點相關分析,包括miRNA靶基因驗證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗證等。 需要把miRNA潛在結合靶點克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區域,然后與待測miRNA共同轉染細胞內測定R-Luciferase活性高低,F-Luciferase (hLuc+)作為校正內參校正不同樣品之間轉染的轉染效率。MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。堿性磷酸酶
在正常免疫應答過程中,人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 可以驅使白細胞定向遷移到受傷或gan染部位以保護機體防御外來致病物,但是在特定的環境中,免疫細胞也會因過度活化而攻擊正常組織,導致自身免疫性疾病。人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 因此也和許多自身免疫性和過敏性等疾病相關聯,包括多發性硬化癥、類風濕關節炎、動脈硬化、哮chuan和移植排斥等。
如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體(ENA),抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風濕因子,循環免疫復合物,抗胰島細胞抗體,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰瘡,蛋白酶,短膜蟲法,肝-腎,肝-腎-胃,肌內膜抗體,角蛋白抗體,抗核抗體,抗核糖體蛋白抗體,抗聚角蛋白微絲蛋白抗體,抗鏈O,抗卵巢抗體,抗平滑肌抗體,抗線粒體抗體,抗心肌抗體,抗組蛋白抗體,粒細胞彈性蛋白酶,皮膚抗體,腎上腺抗體,腎小球基底膜,腎小球基底膜抗體,髓過氧化物酶,條紋肌抗體,網硬蛋白抗體,胃壁細胞抗體,胃蛋白酶,系統性紅斑狼瘡,細菌性滲透性增強因子等。 免疫學ELISA試劑盒FACS可以用于分離表達GFP的細胞和不表達GFP的細胞。
細胞毒性是由合成化合物、細胞自然產生毒性或免疫調節細胞(如細胞毒性T淋巴細胞,自然殺傷細胞等)引起的細胞殺傷事件。目前主要通過對受損細胞釋放的相關底物(如乳酸脫氫酶-LDH)進行定量,從而判斷細胞膜的受損情況。本期,將為大家講解有關細胞毒性的檢測產品、原理及特點等內容。
細胞增殖及毒性檢測是生物相容性測試的一種,檢測藥物或者新型材料在生物環境中的毒性情況,即通過檢測材料或者藥物對細胞的增殖或者生長的影響,來評價藥物或材料的毒性或者活性,主要用于藥物活性篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、抗**藥效測定等;常用MTT法或者CCK-8法檢測,另外也可以通過Live/dead雙染法進行細胞成像,更直觀的記錄細胞的存活情況。
細胞增殖是通過細胞分裂引起的細胞數量增加,在整個生命周期中對正常組織發育和維持是必須的。一些類型的細胞會處于持續增殖狀態,如皮膚和骨髓細胞,但許多成人組織中的細胞會處于非增殖狀態,只有在損傷或感ran時,才能被激huo來補充細胞。與之相反,細胞周期關鍵基因突變引起的細胞增殖失調是各類cancer的標志,會造成**異常的不受控制的生長。增殖檢測一般用于分析分裂中的細胞數量的變化,進而反應細胞的生長狀態及活性,細胞增殖檢測是細胞分析和藥物研發中經常會使用的手段。目前廣泛應用于**生物學,分子生物學,藥代動力學等領域。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組,使宿主細胞長時間穩定表達外源基因。
慢病毒載體(Lentiviralvector)較逆轉錄病毒載體有更廣的宿主范圍,慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細胞。慢病毒載體能夠產生表達shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性細胞、干細胞、受精卵以及分化的后代細胞中表達shRNA,實現在多種類型的細胞和轉基因小鼠中特異而穩定的基因表達的功能性沉默,為在原代的人和動物細胞組織中快速而高效地研究基因功能,以及產生特定基因表達降低的動物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者,不但具備特異性地使基因表達沉默的能力,而且充分發揮了慢病毒載體自身所具備的優勢,為基因功能的研究提供了更強有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。對于一些較難轉染的細胞,如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,使用慢病毒載體,能大da提高目的基因或目的shRNA的轉導效率,且目的基因或目的shRNA整合到宿主細胞基因組的幾率大da增加,能夠比較方便快捷地實現目的基因或目的shRNA的長期、穩定表達。研究者可以利用光來檢測、測量和控制分子信號、細胞和細胞群,以便了解它們的活動。Human MYLK-MYLKP1 Pseudogene Transcription Analysis qPCR Kit
GFP可以標記轉基因修飾的ES細胞,然后可以將其用于轉入小鼠并產生轉基因小鼠。堿性磷酸酶
就eGFP而言,相對于GFP,其熒光強度更強、熒光性質更穩定。mCherry是從DsRed演化來的性能*好的一個單體紅色熒光蛋白,可以和GFP系列熒光蛋白共用,實現多色標記。熒光蛋白活性和被融合的目標蛋白功能相互沒有明顯影響。這些熒光標簽蛋白,其融合表達目的蛋白后具有以下優點:1.不用破碎組織細胞和不加任何底物,直接通過熒光顯微鏡就能在活細胞中發出綠色熒光,實時顯示目的基因的表達情況,而且熒光性質穩定,被譽為活細胞探針。2.其自發熒光,不需用目的基因的抗體或原位雜交技術就可推知目的基因在細胞中的定位等情況。3.同時細胞內的其它產物不會干擾標簽蛋白檢測,從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高而且重現性。4.其低消耗、高靈敏度檢測,十分適用于高通量的藥物篩選。因此現eGFP表達標簽被廣fan地應用于基團表達調控、轉基因功能研究、蛋白在細胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等方面。5.mCherry紅色熒光蛋白在標記病毒顆粒,研究病毒和宿主細胞之間更有得天獨厚的優勢。如用mRFP或mCherry標記HIV病毒顆粒,研究HIV和宿主細胞問的相互作用以及HIV侵染宿主細胞的過程.用mRFP標記慢病毒顆粒,研究慢病毒在小鼠體內的復制過程等。堿性磷酸酶
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1、原代細胞:ScienCell(中國區正規一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養基。
3、細胞培養試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。