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無錫組織提取外泌體分離供貨商

來源: 發布時間:2023-04-01

使用差速離心法分離外泌體主要需要注意的是轉子的選擇。“擺動桶”(SW)轉子和“定角”(FA)轉子,這些轉子的幾何形狀根本不同,因此沉降特性也不同。這些轉子之間的主要區別在于:FA轉子,與旋轉半徑相比,沉積顆粒的較大路徑長度通常較小,允許近似恒定遷移率并簡化描述。然而,第二個區別是圓形FA管的水平橫截面是橢圓形的,不同粒子的路徑長度根據軌跡與橢圓長軸的距離而不同。由于較短的路徑長度,外面顆粒可能沉降得更快,需要根據不同的實驗需要進行選擇。外泌體是一種具有細胞外信息傳遞功能的小囊泡。無錫組織提取外泌體分離供貨商

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。二是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據,表明PS法可提取相當高純度的外泌體。上海快速提取外泌體價格外泌體在很多生理和病理情況下都發揮著不可或缺的作用。

外泌體(細胞外囊泡)目前被認為是通過生物活性脂質、蛋白質以及RNA來進行細胞之間的通訊,同樣外泌體也是目前研究較深入的細胞外囊泡,外泌體的直徑只有我們頭發直徑的百萬分之一(30~150nm),當多泡體與細胞膜融合時釋放到細胞外的時候,富含許多生物活性分子,如脂質、蛋白質、轉移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細胞外,這樣一來就可以被微環境中的靶細胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠處。而外泌體與“目標”進行交流方式主要有兩種途徑,一是通過胞吞作用被攝入到細胞內;二是通過膜融合的方式來與靶細胞膜進行融合,接著就會直接釋放其中含有的物質以及信息至靶標細胞,其實外泌體的作用形式是相互的靶細胞分泌含有細胞特異性RNA的外泌體作用于周圍細胞后可誘導其表型重組而獲得組織特異性的表型,而周圍細胞分泌的外泌體則可以通過調控蛋白表達來調控細胞的生理過程。

分離外泌體的方法之靜水過濾透析:它主要有助于將整個EV從高度稀釋的溶液中分離出來,而無需超速離心過程。280Musante等人展示了用于從尿液樣本中分離EV的HFD方案。在HFD的初始步驟中,用2000×g離心樣品以去除細胞,細菌和碎片作為沉淀。然后,將上清液保存在透析膜(1000kPa)中,1000kPa或更小的顆粒相應地以靜水壓差通過膜。較后,通過離心將外泌體囊泡沉降40,000×g。在HFD分離過程中,外泌體級分在早期階段恢復,與多步離心相比,這被認為是一個優勢。與超速離心相比,HFD也被認為是一種有效的方法。未來可開發更加高效和精確的外泌體分離和檢測技術。

外泌體是由正常或病理條件下的細胞所分泌,含有各種膜蛋白和胞質蛋白。因此,外泌體蛋白也可以作為生物試劑潛在地用于蛋白診斷。外泌體中發現的十種蛋白質主要包括熱休克蛋白8(HSPA8)、CD63抗原(CD63)、β肌動蛋白(ACTB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、烯醇化酶1α、細胞溶質熱休克蛋白90α(HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶打開蛋白、zeta多肽(YWHAZ)、肌肉酸激酶(PKM2)。外泌體蛋白屬于各種功能組,例如四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)、熱休克蛋白(HSC70和HSC90)、膜轉運蛋白(GTPases)和脂質結合蛋白。外泌體標記物及其在免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞術和ELISA等抗體應用中的常用的單克隆抗體。的外泌體分離技術采用了磁珠分離和濾膜分離的方法。上海肺泡外泌體分離費用

外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略,例如外泌體特異性LncRNA干擾RNA技術。無錫組織提取外泌體分離供貨商

外泌體蛋白質特征是:膜結合四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81和CD82),以及常規用于分離的EpCAM和Rab5。其他公認的蛋白質是受體(CD46和CD55)、熱休克蛋白(HSP;Hsc70、Hsp70和Hsp90)、參與外泌體形成的蛋白質(Alix、TSG101)和負責融合和轉運的膜蛋白(GTP酶、膜聯蛋白和flotillin;ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法檢測這些標記蛋白可以用于確認外泌體的存在。也有相關研究稱外泌體含有其他顆粒,如膽固醇(B淋巴細胞來源)、鞘脂、磷酸甘油酯和神經酰胺等。外泌體還運輸形態發生素(Hedgehog、Wingless和Wingless-like),參與黑腹果蠅所描述的組織模式發育。無錫組織提取外泌體分離供貨商

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