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寧波快速提取外泌體分離報價

來源: 發布時間:2023-04-02

外泌體(細胞外囊泡)目前被認為是通過生物活性脂質、蛋白質以及RNA來進行細胞之間的通訊,同樣外泌體也是目前研究較深入的細胞外囊泡,外泌體的直徑只有我們頭發直徑的百萬分之一(30~150nm),當多泡體與細胞膜融合時釋放到細胞外的時候,富含許多生物活性分子,如脂質、蛋白質、轉移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細胞外,這樣一來就可以被微環境中的靶細胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠處。而外泌體與“目標”進行交流方式主要有兩種途徑,一是通過胞吞作用被攝入到細胞內;二是通過膜融合的方式來與靶細胞膜進行融合,接著就會直接釋放其中含有的物質以及信息至靶標細胞,其實外泌體的作用形式是相互的靶細胞分泌含有細胞特異性RNA的外泌體作用于周圍細胞后可誘導其表型重組而獲得組織特異性的表型,而周圍細胞分泌的外泌體則可以通過調控蛋白表達來調控細胞的生理過程。外泌體介導的RNA轉移對基因表達水平和遺傳數據傳遞具有重要的調節作用。寧波快速提取外泌體分離報價

外泌體分離方法之免疫學分離方法:免疫學分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質標記物影響的抗體對外泌體進行標記。這些標記的外泌體可以進一步輕松處理和純化,例如,使用微芯片或磁珠。磁分離后,外泌體被純化,磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法,就可以獲得較高純度提取物,但不會分離出缺乏磁性標記抗體識別的表面標記的外泌體,這可能導致外泌體池表現效果不佳。這種方法雖然既省時又直接,輸出純度較高,但也需要較為昂貴的試劑。西安組織提取外泌體費用外泌體分離和分析的標準化和規范化將有助于外泌體研究領域的進一步發展。

外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡,普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等體液中,具有細胞信使功能,參與細胞通訊。外泌體是目前為止定義較為明確的細胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其生成過程、釋放途徑、大小及功能區別于微囊泡(Microvesicles)和凋亡小體(Apoptosisbodies)。外泌體是內吞起源的小(40–100nm)囊泡群。外泌體和脫落的囊泡都含有特定的蛋白質組、RNA和,dsDNA等。不同的細胞外環境富含不同類型的細胞外囊泡。即使由相同的細胞類型形成,不同類別的囊泡也具有不同的核酸特征。分離外泌體的方法:細胞碎片、凋亡體、外泌體和其他EV一起存在于生物體液中,具有密度、形狀、大小和表面蛋白等物理性質的外泌體是分離機制的基礎。結合兩種或多種分離方法有助于有效地將外泌體與其他干擾成分分離。

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體,包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合,進而靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而打開細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。外泌體富集、分離和檢測是當前外泌體研究的熱點之一。

外泌體蛋白質特征是:膜結合四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81和CD82),以及常規用于分離的EpCAM和Rab5。其他公認的蛋白質是受體(CD46和CD55)、熱休克蛋白(HSP;Hsc70、Hsp70和Hsp90)、參與外泌體形成的蛋白質(Alix、TSG101)和負責融合和轉運的膜蛋白(GTP酶、膜聯蛋白和flotillin;ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法檢測這些標記蛋白可以用于確認外泌體的存在。也有相關研究稱外泌體含有其他顆粒,如膽固醇(B淋巴細胞來源)、鞘脂、磷酸甘油酯和神經酰胺等。外泌體還運輸形態發生素(Hedgehog、Wingless和Wingless-like),參與黑腹果蠅所描述的組織模式發育。外泌體的組成成分包括脂肪、糖、蛋白質等,對其組成成分的分析有助于了解其生物學功能和生理調節作用。寧波快速提取外泌體分離報價

外泌體與肺的關系密切,通過氣道和肺泡微環境的打開和修飾,參與肺疾病如肺結核、肺病等的發生和發展。寧波快速提取外泌體分離報價

外泌體的物理表征方法:常用的外泌體物理表征方法是基于顯微鏡的方法,例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、低溫電子顯微鏡和原子力顯微鏡;動態光散射;納米粒子跟蹤分析;可調電阻脈沖傳感;和單個EV分析等。用于分析外泌體濃度、定量和概況的分子生物方法主要包括:實時定量PCR、數字PCR技術(基于芯片的dPCR、液滴數字PCR、ddPCR)、蛋白質免疫印跡、全基因組測序(next-generationsequencing)、exome-targetedsequencing(下一代測序)、微陣列圖譜技術和ELISA技術等。寧波快速提取外泌體分離報價

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