分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據其表面標志物分離特定類型的外泌體。基于微孔板的酶聯免疫吸附測定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一個例子，用于根據外泌體表面標志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見示例。免疫親和法可用于從結腸病細胞中分離外泌體，其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法，該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術來分離外泌體。外泌體可以作為一種新型的藥物輸送系統，利用其高度選擇性的靶向性，有效地提高藥物的生物利用度。青島尿液外泌體分離企業

外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡，普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等體液中，具有細胞信使功能，參與細胞通訊。外泌體是目前為止定義較為明確的細胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs)，其生成過程、釋放途徑、大小及功能區別于微囊泡(Microvesicles)和凋亡小體(Apoptosisbodies)。外泌體是內吞起源的小(40–100nm)囊泡群。外泌體和脫落的囊泡都含有特定的蛋白質組、RNA和,dsDNA等。不同的細胞外環境富含不同類型的細胞外囊泡。即使由相同的細胞類型形成，不同類別的囊泡也具有不同的核酸特征。分離外泌體的方法：細胞碎片、凋亡體、外泌體和其他EV一起存在于生物體液中，具有密度、形狀、大小和表面蛋白等物理性質的外泌體是分離機制的基礎。結合兩種或多種分離方法有助于有效地將外泌體與其他干擾成分分離。沈陽外泌體分離RNA提取分離過程中避免對外泌體結構和功能造成影響至關重要。

分離外泌體的方法之超濾：樣品通過0.2μm聚醚砜（PES）膜過濾，較大的顆粒物質（如細胞碎片和凋亡體）被滯留出來。然后，包括外泌體在內的半處理濾液樣品通過TFF系統通過500kDa截止濾芯進行超濾過程，進料流速為120mL/min，跨膜壓力<3.5psi跨膜壓力>10:1，外泌體太大而無法通過毛孔并保持保留。相反，包括游離蛋白在內的小分子通過中空纖維孔并作為滲透物洗脫并較終從過程中丟棄。為了獲得高質量的外泌體分離和純化，通過TFF連續重新濃縮截留物樣品，并去除小于500kDa的污染物。較后，將純化的外泌體重懸并儲存在-80°C的聚對苯二甲酸乙二醇（PETG）瓶中的0.1M蔗糖中，并用于所需的分析。通常，通過結合超濾加超速離心或離心加超濾等不同分離方法可以成功分離外泌體，使用較低孔徑的膜過濾和超速離心可提供純外泌體。

外泌體分離方法之密度梯度離心法：這種方法將超速離心機的超速離心與蔗糖密度梯度相結合。具體地說，密度梯度離心用于將外泌體與非囊泡顆粒（例如蛋白質和蛋白質/RNA聚集體）分離。因此，該方法將囊泡與不同密度的顆粒分離。足夠的離心時間比較重要，否則如果外泌體部分具有相似的密度，則仍可能在外泌體部分中發現污染顆粒。該結構不會讓大于1μm的細胞和其他顆粒進入布線區域。一些較小的顆粒和細胞碎片可以進入微柱區域，但被納米纖毛排除，形成直徑為30-200nm的孔。纖毛結構選擇性地捕獲外泌體和小細胞外囊泡。手動超高速離心和自動化離心儀器的分離效果可能存在差異。

外泌體的構成：外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年，Valadi等發現鼠的肥大細胞分泌的exosome可以被人的肥大細胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質，不只是mRNA，exosomes所轉移的microRNA同樣具有生物活性，在進入靶細胞后可以靶向調節細胞中mRNA的水平。這一發現使得研究人員對exosome的研究熱情激增，截止已經通過286項研究發現了41860種蛋白質、2838種microRNA、3408種mRNA。一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中，RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體。現有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。沈陽外泌體分離RNA提取

外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略，例如外泌體特異性LncRNA干擾RNA技術。青島尿液外泌體分離企業

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。二是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據，表明PS法可提取相當高純度的外泌體。青島尿液外泌體分離企業

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