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成都腦脊液外泌體

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-01

外泌體的構(gòu)成:外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年,Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌的exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。一類外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。分離過程中避免對(duì)外泌體結(jié)構(gòu)和功能造成影響至關(guān)重要。成都腦脊液外泌體

生物試劑Tetraspanins是常見的外泌體標(biāo)志物。它們包括CD9、CD63和CD81膜蛋白。Tetraspanins參與外泌體的產(chǎn)生。在抗原呈遞細(xì)胞中,MHC-II分子的功能通過它們整合到富含四跨膜蛋白CD9的細(xì)胞質(zhì)膜區(qū)域中來調(diào)節(jié)。CD63外泌體蛋白被認(rèn)為是病癥的蛋白質(zhì)標(biāo)志物。此外,四跨膜蛋白家族的另一成員CD81在丙型肝炎的細(xì)胞進(jìn)入中起重要作用。慢型丙型肝炎患者血清中的外泌體CD81會(huì)升高,表明CD81可能是丙型肝炎染上的標(biāo)志物。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤表皮生長(zhǎng)因子受體vIII(EGFRvIII)被認(rèn)為是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物。關(guān)于中樞的神經(jīng)系統(tǒng),在腦疙瘩者血清中分離的外泌體中也檢測(cè)到了EGFR、EGFRvIII和TGFβ。鄭州血漿外泌體報(bào)價(jià)表外泌體的構(gòu)成:外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。

外泌體衍生物miRNA的重要應(yīng)用:miRNA是一類主要的小分子、單鏈、非編碼RNA分子,其成熟形式的長(zhǎng)度在20到22個(gè)核苷酸(NT)之間,在幾乎所有生物途徑中發(fā)揮重要作用,包括細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化、免疫反應(yīng),細(xì)胞凋亡,代謝和疙瘩發(fā)生。外泌體在體液中的主要作用是可以保護(hù)miRNA,防止其生物分子在非生理?xiàng)l件下(多次凍融循環(huán)、長(zhǎng)期儲(chǔ)存和極端pH)降解。據(jù)報(bào)道,外泌體來源的miRNA在-20°C下可保持穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)5年,并且對(duì)凍融循環(huán)具有抵抗力.這也使外泌體成為病癥和其他疾病的潛在生物標(biāo)志物。miRNA與包括病癥在內(nèi)的許多疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān),并且還被證明被遠(yuǎn)端或附近的受體細(xì)胞吸收作為外泌體中的貨物,作為細(xì)胞間通訊的一種方法,可能會(huì)影響發(fā)病機(jī)制。所以,外泌體可以被看作是miRNA轉(zhuǎn)移至目標(biāo)受體細(xì)胞的載體。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。外泌體富集、分離和檢測(cè)是當(dāng)前外泌體研究的熱點(diǎn)之一。

外泌體分離方法之親和層析分離法:在親和層析分離法方面,主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結(jié)合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質(zhì),從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術(shù)基于其對(duì)含有HSP的細(xì)胞外顆粒的高親和力。然而,這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標(biāo)記物的細(xì)胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法:介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場(chǎng)中的位置差異。外泌體被吸引到高電區(qū)域,而較大的顆粒將位于低電區(qū)域。該方法速度快,適合用于高通量篩選,但缺點(diǎn)是需要加熱。優(yōu)化外泌體分離方法可以用于解決外泌體復(fù)雜性掩蓋的問題。泉州血液外泌體分離費(fèi)用

外泌體可以通過非典型途徑進(jìn)行排毒,參與細(xì)胞解掉毒和化學(xué)治著的作用。成都腦脊液外泌體

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體頭次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細(xì)胞間通訊,對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。成都腦脊液外泌體

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