外泌體衍生物miRNA的重要應用：外泌體保護miRNA免于降解，使它們比游離miRNA更穩定，并能被特定受體細胞有效整合。因此，在外泌體攜帶的貨物中，miRNA可以提供有關它們來源的細胞類型、靶標和細胞狀態的身份信息。越來越多的證據表明，疙瘩細胞來源的外泌體已成為通過傳遞病miRNA促進疙瘩細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉移和疙瘩微環境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性疙瘩的生長和轉移至關重要，因為新血管可以提供額外的氧氣和營養物質，還可以清理廢物。比如：病細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和疙瘩轉移。外泌體分離的方法會影響外泌體樣品的質量和數量。東莞快速提取外泌體分離公司

外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡，普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等體液中，具有細胞信使功能，參與細胞通訊。外泌體是目前為止定義較為明確的細胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs)，其生成過程、釋放途徑、大小及功能區別于微囊泡(Microvesicles)和凋亡小體(Apoptosisbodies)。外泌體是內吞起源的小(40–100nm)囊泡群。外泌體和脫落的囊泡都含有特定的蛋白質組、RNA和,dsDNA等。不同的細胞外環境富含不同類型的細胞外囊泡。即使由相同的細胞類型形成，不同類別的囊泡也具有不同的核酸特征。分離外泌體的方法：細胞碎片、凋亡體、外泌體和其他EV一起存在于生物體液中，具有密度、形狀、大小和表面蛋白等物理性質的外泌體是分離機制的基礎。結合兩種或多種分離方法有助于有效地將外泌體與其他干擾成分分離。東莞快速提取外泌體分離公司超高速離心是常用的外泌體分離方法之一。

外泌體分離方法之過濾法：超濾膜也可用于外泌體的分離。根據微泡的大小，使用超濾膜過濾的方法可以將外泌體與蛋白質和其他大分子分離。外泌體也可以通過多孔結構捕獲它們來分離。常見的過濾膜孔徑為0.8m、0.45m或0.22m，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體。比如微柱多孔硅纖毛結構一般用于分離40-100nm外泌體。在初始步驟中，去除較大的囊泡。在接下來的步驟中，外泌體會群集中在過濾膜上。隔離步驟相對較短，但該方法需要用PBS緩沖液對硅結構進行預孵育。除標準過濾技術外，切向流過濾在有效分離外泌體方面也有著嘗試應用，通過切向流過濾技術去除游離肽和其他小化合物從而分離具有確定大小的外泌體。此外，在體外研究和脂肪組織中，也會采用超濾與SEC的結合的方式來分離外泌體。通過(a)對片上過濾器施加壓力或(b)產生電場，迫使外泌體穿過多孔膜，結合錯流和電泳分選來完成篩分。

外泌體分離方法之親和層析分離法：在親和層析分離法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質，從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術基于其對含有HSP的細胞外顆粒的高親和力。然而，這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標記物的細胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法：介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場中的位置差異。外泌體被吸引到高電區域，而較大的顆粒將位于低電區域。該方法速度快，適合用于高通量篩選，但缺點是需要加熱。未來可開發更加高效和精確的外泌體分離和檢測技術。

外泌體的表征分析：Zeta電位：通過電泳光散射(ELS)測量的Zeta電位測量粒子在電泳場中的速度。Zeta電位是膠體分散體穩定性的指標（非常值）和囊泡表面電荷的量度（+或-符號）。電子顯微鏡分析：對于電子顯微鏡分析，外泌體制劑在PBS緩沖液中按1:10稀釋，隨后在等體積的4%(w/v)多聚甲醛和1%(v/v)戊二醛中固定5分鐘。然后將樣品置于formvar-carbon涂層的600目銅網格上，并在室溫下干燥5分鐘。隨后將樣品在乙酸雙氧鈾溶液（2%水溶液）中進行對比，并在電子顯微鏡（Jeol1230TEM）下觀察，加速電壓為80kV，并連接到數碼相機進行觀察。外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。寧波血液RNA外泌體分離企業

外泌體分離器材的選擇也對分離結果有一定的影響。東莞快速提取外泌體分離公司

外泌體分離方法之超速離心法：超速離心基于顆粒的大小（重量）及其在離心力（100,000–110,000×g）下的離心沉降。至于去除的細胞碎片和不需要的顆粒可以通過稱為差速離心的幾步慢速離心來獲得。外泌體的純化可以采用蔗糖梯度密度離心純化法：即：在蔗糖梯度(1.13–1.19g/mL)或緩沖液中進行，以實現更高的富集、產量和純度增加。外泌體分離方法之微流控分離法：微流控分離法主要是在微芯片上進行的，這里我們需要提及的是，微流控分離法法可用于外泌體分離（免疫結合和磁結合、過濾），效率相對較高（約90%）。東莞快速提取外泌體分離公司

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