外泌體分離方法之尺寸排阻色譜分離法：尺寸排阻色譜(SEC)用于根據尺寸而非分子量分離大分子。該技術應用了一種填充有多孔聚合物珠子的柱子，該珠子含有多個孔和隧道。分子根據它們的直徑穿過珠子。小半徑分子通過色譜柱的孔遷移需要更長的時間，而大分子從色譜柱中洗脫得較早。尺寸排阻色譜可以精確分離大分子和小分子。此外，該方法可以應用不同的洗脫溶液。與離心機離心方法相比，色譜分離具有較多的優勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，避免了因剪切力所造成的囊泡結構改變。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中存在的外泌體的技術。此外，SEC方法與超濾相結合已用于分離和分析尿源性外泌體。此外，流場-流分餾結合紫外分析儀和光散射檢測器已被應用于分析外泌體的大小和純度。流場-流分餾結合拋物線和交叉流來分離外泌體。獲得的外泌體已通過電子顯微鏡和質譜檢測。外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略，例如外泌體特異性LncRNA干擾RNA技術。杭州上清外泌體費用

分離外泌體的方法之降水：它是一種基于生物體液中外泌體的電荷沉淀的方法。帶負電荷的外泌體可以與PEG35,000Da基質中帶正電荷的魚精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌體的回收和重懸比基于超速離心的分離更有效。聚合物沉淀法以更少的勞動力和昂貴的設備分離尿外泌體的潛在益處。該方法首先利用DL-二硫蘇糖醇溶液還原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合網絡，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可實現外泌體的沉淀。還有利用聚合物沉淀方法并消除超速離心的商業試劑盒。ExoQuick?、Exo-spin?是來自Invitrogen?和miRCURY?的市售總外泌體分離試劑。鄭州細胞外泌體分離制造商外泌體可以作為一種新型的藥物輸送系統，利用其高度選擇性的靶向性，有效地提高藥物的生物利用度。

外泌體分離方法之密度梯度離心法：這種方法將超速離心機的超速離心與蔗糖密度梯度相結合。具體地說，密度梯度離心用于將外泌體與非囊泡顆粒（例如蛋白質和蛋白質/RNA聚集體）分離。因此，該方法將囊泡與不同密度的顆粒分離。足夠的離心時間比較重要，否則如果外泌體部分具有相似的密度，則仍可能在外泌體部分中發現污染顆粒。該結構不會讓大于1μm的細胞和其他顆粒進入布線區域。一些較小的顆粒和細胞碎片可以進入微柱區域，但被納米纖毛排除，形成直徑為30-200nm的孔。纖毛結構選擇性地捕獲外泌體和小細胞外囊泡。

分離外泌體的方法之過濾：過濾方法只取決于分子量或組分的大小，并有助于獲得較佳的外泌體產量。超濾、凝膠過濾和靜水透析包含在外泌體分離的過濾原理下。外泌體可以根據其定義的分子量或體積排阻限，使用標準膜過濾器從其他EV組分和細胞碎片中分離出來。市售的聚偏二乙烯碳酸酯膜過濾器具有各種孔徑范圍，用于滲透、納濾和微濾應用。分離外泌體的方法之體積排阻色譜（SEC）：該方法主要有助于從分離的外泌體中去除蛋白質和脂蛋白雜質，它已被用于從尿液和血漿蛋白中分離外泌體。它被用作超速離心和超濾的后續分離方法。瓊脂糖2B/CL4B、qEV和瓊脂丙烯酸S-400是通常用于凝膠過濾色譜分離外泌體的色譜柱。SEC可以在低壓下進行，這有助于分離具有完整完整性的外泌體。發現外泌體轉移可能為疾病治著和預后提供新的治著策略。

外泌體分離方法之免疫學分離方法：免疫學分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質標記物影響的抗體對外泌體進行標記。這些標記的外泌體可以進一步輕松處理和純化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分離后，外泌體被純化，磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法，就可以獲得較高純度提取物，但不會分離出缺乏磁性標記抗體識別的表面標記的外泌體，這可能導致外泌體池表現效果不佳。這種方法雖然既省時又直接，輸出純度較高，但也需要較為昂貴的試劑。部分外泌體分離方法可能存在對外泌體結構和元素的影響。杭州上清外泌體費用

外泌體與生物體的免疫應答密切相關，通過它們攜帶的抗原和免疫調節分子對免疫系統起到調節作用。杭州上清外泌體費用

外泌體分離方法優缺點對比：差速離心法：差速離心法仍是實驗中常用的外泌體分離技術。主要步驟如下：1.使用離心機低速離心來去除細胞與細胞碎片。2.而后增加轉速通過離心來消除樣本中較大的細胞囊泡。3.再使用高速離心機進行高速離心，通過離心沉淀的方式提取外泌體。在這里，需要注意的是生物流體的粘度與分離的外泌體的純度有較強的相關性。所以，對于高粘度的生物樣品需要超速離心機進行較長時間的離心操作。外泌體分離方法之免疫分離法：免疫芯片方法基于表面外泌體受體，用于根據來源分離外泌體。獲得的外泌體可直接分析或用于DNA或總RNA分離。外泌體胞內蛋白可用作分離外泌體的特異性標志物。此外，基于ELISA的ExoTEST也可以用于有效分離外泌體。其原理是：使用涂有外泌體抗體的ExoTEST板，可以從各種生物體液中分離出外泌體。該方法適用于常見和細胞類型特異性外泌體蛋白的檢測、分析和定量。杭州上清外泌體費用

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