外泌體來源及其釋放途徑：外泌體在人體的主要作用是充當局部和全身信號和調節系統。外泌體（直徑30-150nm）是較小的血管外囊泡亞群，它的還包括微泡（50nm-1μm）和凋亡小體（50nm-5μm）。外泌體的來源是內體系統。由內膜出芽形成早期核內體，早期內體可以與內吞小泡融合，從而引導它們的貨物進行回收、降解或分泌。當早期內體成熟為晚期內體時，在它們成熟為晚期核內體的過程中，囊泡膜向內出芽，導致多泡體(MVB)的產生，其中包含許多腔內囊泡(ILV).在此階段，MVB可以與溶酶體融合（ILV繼續降解）或與質膜融合，導致ILV釋放到細胞外空間。這些釋放的ILV稱為外泌體，包含著許多源自細胞內部的蛋白質、核酸、脂質和多糖。另一種釋放機制就是由于質膜向外出芽，從而導致形成所謂的脫落微泡或外泌體。外泌體是一種具有細胞外信息傳遞功能的小囊泡。尿液外泌體

細胞外泌體的來源和表征方法：細胞外泌體是直徑為30-150nm的血管外囊泡亞群。在過去的20年里，科學家已經從包括正常細胞和病細胞在內的許多細胞類型中分離出外泌體，并且研究了它們對其他細胞的影響。外泌體是由多種大分子組成，例如核酸、蛋白質和脂質。細胞外泌體具有天然的特定細胞靶向特性，通常被設計用于靶向大分子（DNA和RNA）和藥物遞送系統（多柔比星、紫杉醇和紫杉醇）。目前常用細胞外泌體的分離方法主要是超速離心法、密度梯度離心法、超濾分離法、基于聚合物的沉淀法、親和沉淀分離法、免疫磁珠法和色譜法等。廣州尿液外泌體發現外泌體轉移可能為疾病治著和預后提供新的治著策略。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備，應用不普遍。二是微流控分離法，該方法通過負壓及震蕩等機械原理分離外泌體，產量純度均具有較大幅度提高，但需要特定設備配合。外泌體分離方法之納米粒徑分析法：確定性橫向位移依賴于顆粒流動路徑的變化，而顆粒流動路徑取決于顆粒尺寸。這種方法雖然比較簡單，但是需要使用掃描電鏡技術、動態光散射技術、納米粒子跟蹤分析技術、單粒子干涉反射成像傳感器（SP-IRIS）技術等。對于外泌體大小、形態、外泌體的濃度、zeta電位等分析也可以使用粒度分析儀。

外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對分離的外泌體產生溫和影響而且可以產生中性的pH值。由此，出現了幾種常見的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執行，無需額外設備，只需用高速離心機進行超速離心可以獲得高產量的外泌體。但是此方法的缺點是：非外泌體材料對外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個問題。此外，分離物中的聚合物可能會干擾下游分析。外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略，例如外泌體特異性LncRNA干擾RNA技術。

外泌體的表征分析：Zeta電位：通過電泳光散射(ELS)測量的Zeta電位測量粒子在電泳場中的速度。Zeta電位是膠體分散體穩定性的指標（非常值）和囊泡表面電荷的量度（+或-符號）。電子顯微鏡分析：對于電子顯微鏡分析，外泌體制劑在PBS緩沖液中按1:10稀釋，隨后在等體積的4%(w/v)多聚甲醛和1%(v/v)戊二醛中固定5分鐘。然后將樣品置于formvar-carbon涂層的600目銅網格上，并在室溫下干燥5分鐘。隨后將樣品在乙酸雙氧鈾溶液（2%水溶液）中進行對比，并在電子顯微鏡（Jeol1230TEM）下觀察，加速電壓為80kV，并連接到數碼相機進行觀察。外泌體可以傳遞生物分子，例如蛋白質、DNA、mRNA等，影響接收器細胞的表現型和生理活性。南京外泌體分離

外泌體在疙瘩微環境中的參與，反映了其具有的高度的異質性和復雜性。尿液外泌體

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。二是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據，表明PS法可提取相當高純度的外泌體。尿液外泌體