逆轉(zhuǎn)錄過程由逆轉(zhuǎn)錄酶催化，此酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱為與RNA互補DNA（complementaryDNA,cDNA）。逆轉(zhuǎn)錄酶在生物界存在于逆轉(zhuǎn)錄病毒以及真核細胞（如端粒酶）中，擬逆轉(zhuǎn)錄病毒沒有單獨的逆轉(zhuǎn)錄酶，其DNA聚合酶帶有逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，可能與病毒的惡性轉(zhuǎn)化有關。人類免疫缺陷病毒（HIV）就是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，含有逆轉(zhuǎn)錄酶。在小鼠及人的正常細胞和胚胎細胞中也有逆轉(zhuǎn)錄酶，例如端粒酶就是一種逆轉(zhuǎn)錄酶，推測可能與細胞分化和胚胎發(fā)育有關。逆轉(zhuǎn)錄后的DNA可用于構(gòu)建基因工程載體。北京快速逆轉(zhuǎn)錄試劑公司

反轉(zhuǎn)錄酶的注意事項，隨機引物：適合各種RNA的RT，尤其適合模板豐度很低的情況（比如某個gene表達量很低）。選擇隨機引物時，首先鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板，然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系，一般建議每5μg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5μg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導致小片段產(chǎn)物（<500bp）的增加和長片斷、全長產(chǎn)物產(chǎn)物的降低。酵母菌逆轉(zhuǎn)錄酶是逆轉(zhuǎn)錄酶家族中的一個重要表示，逆轉(zhuǎn)錄在研究RNA表達調(diào)控等領域有普遍的應用前景。煙臺彩色反轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶通常具有多種活性，如逆轉(zhuǎn)錄活性、復制活性與RNA酶H活性。

miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄：miRNA，即microRNA，是一類非常短的RNA分子，只有幾十到幾百個核首酸，在正常細胞存活期間會產(chǎn)生大量的miRNA。miRNA起著重要的抑制作用，它可以抑制特定mRNA的表達以及細胞中內(nèi)含物翻譯和轉(zhuǎn)錄等功能他們是催化機制，負責影響細胞及其產(chǎn)物的生物學復雜性和穩(wěn)定性，對于宿主機體影響是非常重要的。miRNA加尾法是一種獲得miRNA及其前體的研究方法之。較重要的是，它是RNA千擾技術(shù)的一個重要組成部分。過去的研究發(fā)現(xiàn)，通過miRNA加尾法獲得的新miRNA表達調(diào)節(jié)了細胞信號傳導、細胞分裂和細胞凋亡等多重信號傳遞通路，其過程非常復雜。

多逆轉(zhuǎn)錄酶都具有多種酶活性，DNA指導的DNA聚合酶活性；以反轉(zhuǎn)錄合成的首先條DNA單鏈為模板，以dNTP為底物，再合成第二條DNA分子。除此之外，有些反轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性，這可能與病毒基因整合到宿主細胞染色體DNA中有關。反轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)對于遺傳工程技術(shù)起了很大的推動作用，目前它已成為一種重要的工具酶。用組織細胞提取mRNA并以它為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成出互補的DNA(cDNA)，由此可構(gòu)建出cDNA文庫(cDNalibrary)，從中篩選特異的目的基因，這是在基因工程技術(shù)中較常用的獲得目的基因的方法。逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)的發(fā)展使RNA研究得到極大便利。

反轉(zhuǎn)錄酶的選擇：反轉(zhuǎn)錄酶（Reversetranscriptase）又稱逆轉(zhuǎn)錄酶。是以RNA為模板指導dNTP合成互補DNA（cDNA）的酶。一部分反轉(zhuǎn)錄酶具有RNA酶活性，能夠在轉(zhuǎn)錄后降解RNA-DNA雜交鏈中的RNA鏈。如果反轉(zhuǎn)錄酶沒有Rnase酶活性，可加入RNaseH來獲得更高的qPCR效率。常用的酶包括Money鼠白血病病毒（MMLV）反轉(zhuǎn)錄酶和禽成髓細胞瘤病毒（AMV）反轉(zhuǎn)錄酶。依據(jù)RT-PCR，理想的狀態(tài)下是選擇具有較高熱穩(wěn)定性的反轉(zhuǎn)錄酶，cDNA的合成才能在較高的溫度下進行，確保成功轉(zhuǎn)錄具有較高二級結(jié)構(gòu)的RNA，并確保在整個反應過程中的全部活性，從而得到質(zhì)量更高的cDNA。逆轉(zhuǎn)錄過程的揭示是分子生物學研究中的重大發(fā)現(xiàn)，是對中心法則的重要修正和補充。煙臺逆轉(zhuǎn)錄試劑

逆轉(zhuǎn)錄是蛋白質(zhì)的先導RNA的合成方式。北京快速逆轉(zhuǎn)錄試劑公司

逆轉(zhuǎn)錄酶還有DNA內(nèi)切酶活性，這可能與病毒基因整合到宿主細胞染色體DNA中有關。逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)對于遺傳工程技術(shù)起了很大的推動作用，它已成為一種重要的工具酶。用組織細胞提取mRNA并以它為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成出互補的cDNA，由此可構(gòu)建出cDNA文庫（cDNAlibrary），從中篩選特異的目的基因，這是在基因工程技術(shù)中較常用的獲得目的基因的方法。簡要過程表示：逆轉(zhuǎn)錄酶的作用是以dNTP為底物，以RNA為模板，tRNA(主要是色氨酸t(yī)RNA)為引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一條與RNA模板互補的cDNA單鏈，它與RNA模板形成RNA-cDNA雜交體。隨后又在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，水解掉RNA鏈，再以cDNA為模板合成第二條DNA鏈。至此，完成由RNA指導的DNA合成過程。病毒復制方式：逆轉(zhuǎn)錄病毒（屬于RNA病毒）：RNA→DNA→RNA。擬逆轉(zhuǎn)錄病毒（屬于DNA病毒）：DNA→RNA→DNA。北京快速逆轉(zhuǎn)錄試劑公司