穩定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。PEI轉染試劑使用的注意事項有哪些？國產PEI轉染試劑使用說明

PEIMAX——高產工業化轉染試劑-高度濃縮，可制備大量轉染試劑KyforaBiobyPolysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由KyforaBiobyPolysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來，經過眾多業內人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩定性高，可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續的高基因表達細胞體系，實現從新藥研發到工業化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）。更多關于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！浙江高質量PEI轉染試劑官方代理PEI轉染試劑在使用時出現沉淀的原因是什么?

上海曼博生物醫藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫藥科技服務，以創新和為價值理念，通過自身研發團隊，以及與國內外專業科研團隊強強聯合，不斷創新，為生命科學和醫藥研發行業提供產品和服務。生物醫學工程是綜合應用生命科學與工程科學的原理和方法，從工程學角度在分子、細胞、組織、乃至整個人體系統多層次認識人體的結構、功能和其他生命現象，研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛生保健的人工材料、制品、裝置和系統技術的總稱。也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio，查看更多技術文章！

PEIMAX-----高產工業化轉染試劑-高度濃縮，可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已大量應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來，經過眾多業內人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩定性高，可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續的高基因表達細胞體系，實現從新藥研發到工業化生產的輕松過度。而且與大多數細胞轉染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本（部分案例可降低90%轉染成本）。PEI轉染試劑從96孔板到1000L生物反應器規模都能提供連續性的高表達蛋白或病毒。

材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾，儲存于4℃備用。1×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃備用。方法：1．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染。轉染前換入2mL預熱的無血清培養基。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物。PEI轉染試劑包裝病毒的滴度有多高？不同分子量PEI轉染試劑蛋白產量

PEI轉染試劑有沒有毒性？國產PEI轉染試劑使用說明

PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中；2)放入攪拌轉子，放置于磁力攪拌器上，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦；3)等待PEIMAX40K完全溶解，通常需要5分鐘左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1；5)如果不小心超過7.1，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1；6)將溶液轉移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液；8)按需分裝，4°C儲存（切記不可冷凍）；注：未經配制的粉末有效期為2年。配置成液體后分裝在合適的瓶子中，并且保存在4℃的轉染試劑將可在6個月之內保持性能。如jin用于蛋白定性研究，分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。
國產PEI轉染試劑使用說明