經常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養之前有必要花時間來優化下這個肝素濃度參數嗎?現在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養基中培養MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
人源血小板裂解物是一種能有效支持間充質干細胞等人類細胞生長的高效細胞培養補充劑。制備血小板裂解液中國代理權
使用胎牛血清(FBS)和MSC的離體擴增其他動物衍生的已氣餒由監管機構,以減少發送朊病毒和其他動物傳染病的危險,并且避免在所述異種免疫反應主辦。然而,由于缺乏FBS制劑標準化導致細胞培養性能不一致性和FBS生產已經到來,因為動物福利問題很初提出血小板裂解液(PL)作為動物血清的替代物,用于由Doucet等人體外擴增MSC。包含在PL的生物活性分子和生長因子支持的MSC從骨髓(BM)導出的膨脹,臍帶血(UCB),和脂肪組織(AT),與FBS相比顯示出有利的結果。此外,間充質干擴大了與PL-富集介質已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病(GVHD)造血干細胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者,主要是中度至重度的膝關節骨性關節炎。
干細胞培養血小板裂解液中國代理權血小板裂解液使用的時候有什么注意事項嗎?
血小板裂解液(plateletlysate,PL)是自體或異體血小板富集物經細胞裂解后的產物,已經被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetalbovineserum,FBS)的替代品,應用于間充質干細胞(mesenchymalstemcells,MSC)的大規模擴增培養。但是,PL對諸如牙髓干細胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)、牙周膜干細胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)及根尖牙rutou干細胞(stemcellsfromapicalpapilla,SCAP)等牙源性干細胞的生物學效應尚不明確。
為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結合泊松統計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結論一致。血小板裂解液主要含有哪些生長因子?
本研究中使用的hPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業規模(很小批量為20L)生產的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養,與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養基進行比較。在所有實驗中,每天都監測細胞,每次傳代結束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數器計數然后繼續傳代。更多關于Sexton的相關產品歡迎咨詢上海曼博生物!血小板裂解液的有效成分是什么呢?無需添加肝素血小板裂解液用途
人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度。制備血小板裂解液中國代理權
為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結合泊松統計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結論一致。
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