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靖江軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-12-31

elisa試劑盒操作所需主要設(shè)備,包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液)洗滌緩沖液,稀釋液,終止液,底物緩沖液,TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液,ABTS使用液,抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。正常人血清和陽性對照血清。聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,elisa試劑盒檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。4℃冰箱,37℃孵育箱。試驗(yàn)原理,試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa試劑盒).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。可以先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。Elisa 試劑盒可保障檢測過程的準(zhǔn)確性。靖江軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株中心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與一次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并且在波長:450nm處測量O.D.值,按照本HEVIgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。靖江軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Elisa試劑盒通常分為直接Elisa、間接Elisa、競爭性Elisa等不同類型。

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elisa試劑盒是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。elisa試劑盒是一種特異性高,回收率好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,普遍應(yīng)用于生命科學(xué)等科研研究領(lǐng)域,也是現(xiàn)在許多科研實(shí)驗(yàn)常用檢測方法。elisa的檢測基礎(chǔ)是通過特異性反應(yīng)與酶底物發(fā)生顯色反應(yīng),從而在血漿、血清或者送來檢測的液體樣品中檢測出所需要檢測的物質(zhì)成分以及含量檢測。elisa試劑盒在我們國內(nèi)有很多不同的叫法名稱,如elisa檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶免試劑盒等。

elisa試劑盒試劑盒用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。一般的醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。完整的elisa試劑盒試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式elisa試劑盒中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的較為終體積而異,在板式elisa試劑盒中一般采用3mol/L。Elisa 試劑盒的檢測原理易于理解。

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酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),通常其基本原理是:首先將一抗體包被到某固相載體表面,再將另一抗體與某酶連接成酶標(biāo)抗體。在測定時(shí),把受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體按不同的步驟與包被抗體結(jié)合形成復(fù)合物。洗滌除去復(fù)合物以外的物質(zhì),結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。Elisa 試劑盒可檢測特定蛋白標(biāo)志物。如皋細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Elisa 試劑盒在生物研究領(lǐng)域不可或缺。靖江軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

安全性:避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。靖江軸突生長誘向因子1(Ntn1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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