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松江區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-07-05

可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法,檢測方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實驗方法,檢測方法等。實施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號:aa1a8029a)中。動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機制研究。松江區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

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實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測標準:a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細胞明顯腫脹、變性,層次結(jié)構(gòu)尚清楚,細胞核結(jié)構(gòu)不清;致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落,結(jié)構(gòu)不清,明顯變性、壞死,部分細胞已溶解泰州泌尿疾病動物模型建模大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。

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本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應(yīng)用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因?qū)W與臨床情況接近;2.相關(guān)的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩(wěn)定性好,成功率高;4.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續(xù)對動物進行磁療,經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測,為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步說明,以充分說明本發(fā)明的目的、技術(shù)特征和技術(shù)效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實驗室研究。

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實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1:e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。淮安品牌疾病動物模型建模

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r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。松江區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司總部位于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號5幢2樓206室,是一家經(jīng)營范圍為:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)。化工產(chǎn)品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學品)的銷售。【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】。的公司。上海東寰生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)В瑸榭蛻籼峁?**的原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型。上海東寰生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。上海東寰生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。

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