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南通成瘤疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2021-10-25

    新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進的基因編輯技術,我國科學家在***神經性疾病的基礎研究方面,取得重要進展。***在小鼠模型上,成功恢復長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學基金委、中國科學院、上海市的相關項目資助下,由中國科學院腦科學與智能技術***創新中心(神經科學研究所)、上海腦科學與類腦研究中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術,成功誘導膠質細胞“變身”為神經元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學術期刊《細胞》8日在線發表了相關研究論文。人類的神經系統包含成百上千種不同類型的神經元。在成熟的神經系統中,神經元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經元的死亡,則會導致不同的神經退行性疾病。在常見的神經性疾病中,視神經節細胞死亡導致的長久性失明和多巴胺神經元死亡導致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經元死亡所導致的。如何在成體中讓視神經節細胞和多巴胺神經元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質細胞進行了基因編輯。小鼠疾病模型應用于轉化醫學研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。南通成瘤疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱:環磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級,1、實驗方法:環磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環磷酰胺,連續注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數較正常對照組小鼠明顯降低。南通疾病動物模型建模原理可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發病率低的缺點。

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    具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發明作進一步闡述。本發明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內含子設計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數據庫基因,采用crispr脫靶效應軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構;步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序對打靶質粒載體進行驗證,圖1為構建好的pirb基因打靶載體的示意圖。

1、動物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:6~8周齡5、實驗動物體重:80~100g6、實驗動物環境:SPF級 1、實驗方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養致24周。2、檢測標準:模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點與正常對照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發生有規律的變化,乳腺導管上皮細胞首先發生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現不同程度的導管上皮增生和不典型增生。第13周開始發現>3mm的乳腺*,至第24周時70%的大鼠發生乳腺*,并可見一只大鼠同時發生多個乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現出不同程度的上皮細胞增生和不典型增生,提示處于*發生的不同進展階段。能夠準確模擬人相關特定功能與疾病特征。

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    圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。上海東寰為您提供完善的大鼠動物疾病模型。浦東新區成瘤疾病動物模型建模

可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。南通成瘤疾病動物模型建模

1、動物模型名稱:腹主動脈縮窄致心衰大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環境:SPF級 1、實驗方法:采用主動脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動脈,在腎動脈上方將腹主動脈與鈍頭8號探針一起結扎后,小心抽出針頭。手術造模后大鼠正常飼養3個月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計算心體比(VW/BW),并進行心功能檢測,包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對心肌組織進行病理學檢測.2、檢測標準:模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則***減小,與正常對照組相比具有統計學差異。病理學檢測結果表明心肌出現典型心衰樣病理改變。南通成瘤疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司致力于商務服務,以科技創新實現***管理的追求。上海東寰生物作為經營范圍為:從事生物科技領域內的技術開發、技術轉讓、技術咨詢、技術服務。化工產品(除危險化學品、監控化學品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學品)的銷售。【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】。的企業之一,為客戶提供良好的原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型。上海東寰生物繼續堅定不移地走高質量發展道路,既要實現基本面穩定增長,又要聚焦關鍵領域,實現轉型再突破。上海東寰生物始終關注商務服務市場,以敏銳的市場洞察力,實現與客戶的成長共贏。

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