Genovis的FabRICATOR MagIC自動樣品制備可用于分析和監測不同的CQA。mAb在生產或儲存過程中的氧化就是這樣一種CQA，可能會影響zhiliao產品的質量。為了展示FabRICATOR MagIC如何解決這個問題，對6種mAb的混合物進行強制降解（室溫下3個月），并通過反相LC-MS進行分析。當在完整水平上分析mAb時，可以檢測到mAb5豐度的顯著差異，同時出現許多新的峰。然而，無法獲得可靠的質量數據。使用FabRICATOR MagIC，mAb5變化的來源在Fab區域內。隨后還原為 Fc/2、LC 和 Fd' 片段，可以識別差異是由于 mAb5 Fd' 片段上的色氨酸氧化，通過形成氧代內酯 （+14 Da） 和二氧代內酯 （+30 Da） 以及 mAb5 LC （-18 Da） 的琥珀酰亞胺化來揭示。此外，還可檢測到mAb3輕鏈的異構化。該示例說明了FabRICATOR MagIC在mAb中級分析中的強大功能，它創建的片段足夠小，可以精確定位特定的修飾，而無需耗時耗費資源的肽圖分析，所有這些都以相對較少的手動操作時間快速完成。可用于研究特定Fc區域的質量屬性，有助于研究GS連接子的修飾。廣東FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學

抗體由于其大小和復雜性，是一種難以表征的分子。偶聯藥物有效載荷是對抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法，但進一步增加了異質性的復雜性和風險。抗體藥物偶聯物 （ADC） 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進行仔細和詳細的表征，并且需要適當的分析工作流程。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶將ADC消化成其亞基，可以詳細表征這類復雜的藥物。Genovis的內切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC，但降低復雜性并提高分辨率。北京IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進行詳細表征的中級方法。

不同于IdeS，Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶，可在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1，在兩小時內產生完整的 Fab 和 Fc 片段，無需還原條件。該酶對具有突變鉸鏈區域的抗體（如 LALA 突變）具有活性，并啟用中級 LC-MS 來表征具有突變鉸鏈的抗體的關鍵質量屬性。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1 （...KSCDK / THTCPPCP...），生成完整的 Fab 和 Fc 片段。FabDELLO 是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單個消化位點是人 IgG1 的三維結構的結果，使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖，則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現額外的消化位點。FabDELLO在天然條件下具有活性，需要鈣離子的存在。在37°C和pH 7-8.5下獲得良好活性。FabDELLO 是從 Bdellovibrio 細菌克隆而來的，并在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 32 kDa。

大多數商業zhiliao性抗體屬于IgG類，在Fc結構域中含有N-聚糖。一個重要的關鍵質量屬性是糖基化曲線，因為它會影響穩定性、溶解度、藥效學和藥代動力學特性。這種翻譯后修飾可能發生在生物工藝開發和制造過程中，因此需要密切監測。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶已成為一種被接受的快速表征單克隆抗體（mAb）的分析工具。FabRICATOR在鉸鏈下方消化IgG，產生F（ab'）2和Fc/2片段。單個FabRICATOR消解位點和質量譜的后續精度使Fc糖基化譜能夠檢測，從而可以監測批次間的一致性和其他關鍵質量屬性。剩下一個連接子殘基（甘氨酸殘基），這有助于識別位于Fc區域的修飾。

與IdeS不同，在蛋白質zhiliao藥物的質量控制過程中，詳細分析和識別質量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法，這包括確認連接蛋白的質量以及蛋白質接頭的質量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質結構域來幫助這種質量控制。然而，連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點，導致連接子內多個位點同時水解。消化的產物通常由連接蛋白的幾種變體組成，并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質性通常不會對蛋白質亞基的詳細表征產生負面影響，但有助于直接表征連接子，但有時需要更均勻的消化產物來詳細分析單個蛋白質結構域。IgA2 亞類以三種等位基因形式存在，A2m1、A2m2 和 A2m3。廣東GlycINATORIdeS蛋白酶抗體酶切

可消化精氨酸殘基的 C 末端蛋白質，包括難以與其他酶消化的 Arg-Pro 鍵。廣東FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR（IdeS），為客戶提供了許多選擇，以滿足他們的需求。 凍干形式用于高度靈活的方法開發的目的，并隨時準備使用，只需重組和添加到IgG樣本。 凍干酶的靈活性也意味著它可以應用于更高的通量和自動化的工作流程。 Genovis還提供了在瓊脂糖樹脂上固定化的酶，在隨時可用的旋轉柱中，這可以極大限度地減少在樣品中殘留的酶，這可能是有利的。 對于更多的制備應用，我們提供FabRICATOR Fab2試劑盒，這是IgG片段生成和純化的強大工具。 這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱，用于亞基的親和純化。 由于FabRICATOR在非還原條件下是活性的，F(ab’)2片段保留其鏈間和鏈內二硫鍵，如果片段想用于結合研究，這一點尤為重要，因為結合效率和免疫反應性將被保留。廣東FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學