啟動反應與結果分析確認參數無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應結束后,通過軟件查看結果:定量結果:根據標準曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達量(相對定量)。溶解曲線:若出現單一尖銳峰,說明擴增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應條件問題。 污染防控(重點)核酸污染:嚴格分區操作:將試劑配制區、樣本處理區、PCR 擴增區分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實驗臺面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑分裝保存(避免反復凍融),陰性對照(無模板)和空白對照(無菌水)必須設置,以監測是否污染。RePure-A的應用場景極為廣闊,適用于基因表達分析、遺傳病檢測、微生物學研究等多個領域。江蘇雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢
RePure-T三槽PCR儀是一款高性能的分子生物學儀器,專為生命科學研究、臨床檢測和疾病預防與控制等領域設計。該儀器采用了獨特的三槽模塊設計,可以同時運行三個不同的PCR梯度程序,實時顯示程序進展及剩余時間,支持PCR儀運行中間編程,極大提高了實驗的靈活性和實用性。RePure-T三槽PCR儀具備三個**的PCR反應槽,每個反應槽都可以設置不同的PCR反應條件,如溫度、時間、循環次數等。這種設計使得用戶可以在同一臺儀器上同時進行三個不同的PCR反應,無需等待一個反應結束后再進行下一個反應,從而**提高了實驗效率和結果的一致性。同時,該儀器能夠實時顯示程序進展及剩余時間,讓用戶隨時了解實驗進程,及時調整實驗條件。此外,RePure-T三槽PCR儀支持PCR儀運行中間編程,用戶可以在實驗過程中隨時修改或添加新的PCR反應程序,無需停止當前的實驗進程。這種靈活的編程方式使得用戶可以更加方便地進行實驗設計和調整,提高了實驗的可操作性和成功率。在實際應用中,RePure-T三槽PCR儀的高性能和高可靠性使其在分子克隆、基因表達和基因分型等方面的研究中發揮著重要作用。例如,在分子克隆領域,該儀器可以用于DNA片段的定性與定量分析。 江蘇雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢RePure-(D)B在梯度功能下,可以同時在不同溫度進行PCR反應,優化反應條件。
快速檢測沙門氏菌:沙門氏菌是常見的食源性致病菌,可引發食物中毒等疾病。利用 PCR 儀,針對沙門氏菌的特定基因序列設計引物,能快速從食品樣本中擴增出相關基因片段,從而判斷食品中是否存在沙門氏菌。相比傳統檢測方法,縮短了檢測時間,提高了檢測效率。檢測大腸桿菌 O157:H7:大腸桿菌 O157:H7 是一種具有強致病性的菌株,能產生志賀樣,對人體健康危害極大。通過 PCR 技術檢測其特異性基因,如 stx1、stx2 等基因和 eaeA 毒力島基因等,可準確判斷食品中是否含有該病菌,有效保障食品安全。檢測李斯特菌:李斯特菌在環境中廣存在,能在低溫下生長繁殖,常污染乳制品、肉類等食品。運用 PCR 儀檢測李斯特菌的 hlyA 基因等特異性基因,可快速篩查食品中的李斯特菌,防止因食用被污染食品而引發李斯特菌病。
精確含量測定:熒光定量 PCR 技術作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉基因成分,還可以通過標準曲線法或相對定量法等手段,對轉基因成分進行精確的定量分析,準確測定樣本中轉基因成分的含量,為轉基因生物的監管、標識管理以及風險評估等提供更詳細、準確的數據支持。滿足法規要求:在食品安全管理和國際貿易中,許多法規和標準對轉基因成分的含量有明確的規定和限量要求。PCR 儀的定量分析功能能夠幫助檢測機構和企業準確判斷產品是否符合相關法規標準,確保產品的合規性。RePure-A即時獲取實時數據,增強了實驗的可控性和數據可靠性。
準備試劑:準備 PCR 反應所需的各種試劑,包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、緩沖液、引物、Mg2?等。引物是決定 PCR 特異性的關鍵因素,需根據待檢測的轉基因成分的特定基因序列設計合成特異性引物。配置反應液:按照一定的比例和順序,將各種試劑加入到無菌的 PCR 管中,配置成 PCR 反應體系。一般反應體系包括 10×PCR 緩沖液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl?、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及適量的模板 DNA,總體積通常為 20μL 或 50μL。RePure-(D)B梯度功能進行PCR反應可以有效地優化實驗條件,提高反應的特異性和效率,得到更可靠的實驗結果。南京梯度基因擴增儀PCR儀品牌排行
RePure-A憑借其緊湊的結構,能夠有效節省實驗室的占用空間,提升實驗室的整體布局效率。江蘇雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢
儀器操作設置放置樣品板:將密封好的 96 孔板平穩放入 qPCR 儀的樣品槽,確保孔位對齊,蓋緊儀器艙門。程序設置(通過儀器軟件):預變性:通常 95℃,30 秒 - 5 分鐘(熱啟動酶,使模板完全變性)。循環階段(變性→退火→延伸,同時采集熒光):變性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解鏈)。退火 / 延伸:根據引物 Tm 值設置溫度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物結合并延伸,熒光染料 / 探針在此階段發光)。循環次數:通常 35-40 次(根據模板濃度調整)。溶解曲線(可選):用于驗證擴增產物特異性,程序為 95℃ 15 秒→60℃ 1 分鐘→緩慢升溫至 95℃,同時連續采集熒光(觀察是否有單一峰,排除非特異性擴增或引物二聚體)。熒光通道選擇:根據使用的熒光染料 / 探針類型選擇(如 SYBR GreenⅠ 對應 FAM 通道,TaqMan 探針根據標記熒光選擇)。樣本信息錄入:在軟件中標記樣品類型(如標準品、未知樣本、陰性對照、空白對照)及孔位對應關系。江蘇雙槽基因擴增儀PCR儀要多少錢