用于評(píng)估環(huán)境中微生物的種類和數(shù)量，監(jiān)測(cè)環(huán)境質(zhì)量及污染情況。環(huán)境微生物檢測(cè)：檢測(cè)水體、土壤、空氣等環(huán)境樣本中有害微生物（如大腸桿菌、藍(lán)藻相關(guān)基因等）的含量，評(píng)估環(huán)境受污染程度及生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。微生物群落分析：通過(guò)定量特定功能基因（如降解污染物的基因），研究環(huán)境中微生物的代謝活性及生態(tài)功能。在藥物篩選、藥效評(píng)估和藥代動(dòng)力學(xué)研究中起到重要作用。藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證：通過(guò)檢測(cè)藥物作用后靶點(diǎn)基因的表達(dá)變化，驗(yàn)證靶點(diǎn)的有效性，為新藥研發(fā)提供依據(jù)。藥效評(píng)估：定量分析藥物處理后疾病相關(guān)基因的表達(dá)量變化，評(píng)估藥物的療效及比較好劑量。耐藥性檢測(cè)：檢測(cè)病原體（如細(xì)菌、病毒）中耐藥基因的表達(dá)或突變，指導(dǎo)臨床合理用藥，避免耐藥性的產(chǎn)生。擴(kuò)增效果優(yōu)異的柏恒RePure系列PCR儀在PCR實(shí)驗(yàn)中能夠準(zhǔn)確地放大目標(biāo)DNA片段，提供可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。無(wú)錫QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀電話

1. DNA 指紋分析應(yīng)用：擴(kuò)增人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)序列（STR），如 D21S11、TH01 等位點(diǎn)，用于個(gè)體識(shí)別、親子鑒定和犯罪現(xiàn)場(chǎng)證據(jù)分析。案例：通過(guò) PCR - 毛細(xì)管電泳技術(shù)構(gòu)建 DNA 圖譜，比對(duì)嫌疑人和現(xiàn)場(chǎng)生物樣本（如血跡、毛發(fā)）。2. 物種鑒定應(yīng)用：擴(kuò)增動(dòng)物或植物的特定基因（如細(xì)胞色素 C 氧化酶亞基 I 基因，COI），鑒別瀕危物種或非法貿(mào)易中的生物來(lái)源。案例：檢測(cè)**象牙中的大象 DNA，打擊野生動(dòng)物非法交易。1. 食品微生物檢測(cè)應(yīng)用：檢測(cè)食品中的致病菌（如沙門氏菌、大腸桿菌 O157:H7）或過(guò)敏原基因（如花生、大豆過(guò)敏原蛋白基因），保障食品安全。案例：通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）快速篩查即食食品中的李斯特菌。2. 環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)應(yīng)用：擴(kuò)增環(huán)境樣本（如水、土壤）中的微生物 16S rRNA 基因（細(xì)菌）或 18S rRNA 基因（***），分析微生物群落多樣性或檢測(cè)特定污染物降解菌。案例：監(jiān)測(cè)污水處理廠中脫氮菌的豐度，評(píng)估處理效率。南京普通基因擴(kuò)增儀PCR儀檢測(cè)RePure-A配備的人性化操作界面和直觀的軟件系統(tǒng)使得用戶能夠輕松設(shè)置實(shí)驗(yàn)程序。

準(zhǔn)備試劑：準(zhǔn)備 PCR 反應(yīng)所需的各種試劑，包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、緩沖液、引物、Mg2?等。引物是決定 PCR 特異性的關(guān)鍵因素，需根據(jù)待檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因成分的特定基因序列設(shè)計(jì)合成特異性引物。配置反應(yīng)液：按照一定的比例和順序，將各種試劑加入到無(wú)菌的 PCR 管中，配置成 PCR 反應(yīng)體系。一般反應(yīng)體系包括 10×PCR 緩沖液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl?、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及適量的模板 DNA，總體積通常為 20μL 或 50μL。

PCR儀是利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)，在體外對(duì)特定DNA片段進(jìn)行大量擴(kuò)增的儀器。其原理是通過(guò)高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。具體過(guò)程如下：高溫變性：將待擴(kuò)增的DNA雙鏈在高溫（90-95℃）下解鏈，形成單鏈DNA模板。低溫退火：降低溫度（一般為50-65℃），使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸：在DNA聚合酶的作用下，以引物為起始點(diǎn)，在適宜溫度（一般為72℃左右）下，以dNTP為原料，沿著模板鏈合成新的DNA鏈。采用獨(dú)特的熒光檢測(cè)技術(shù)，能夠在PCR過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA或RNA的定量分析。

啟動(dòng)反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無(wú)誤后，啟動(dòng) qPCR 程序，儀器自動(dòng)運(yùn)行并實(shí)時(shí)顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后，通過(guò)軟件查看結(jié)果：定量結(jié)果：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度（定量），或通過(guò) ΔΔCt 法分析相對(duì)表達(dá)量（相對(duì)定量）。溶解曲線：若出現(xiàn)單一尖銳峰，說(shuō)明擴(kuò)增特異性良好；若有雜峰，需排查引物或反應(yīng)條件問(wèn)題。 污染防控（重點(diǎn)）核酸污染：嚴(yán)格分區(qū)操作：將試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)分開，避免交叉污染。使用濾芯吸頭，每次加樣后更換吸頭，避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器和儀器樣品槽，紫外燈照射消毒操作區(qū)（30 分鐘以上）。試劑污染：試劑分裝保存（避免反復(fù)凍融），陰性對(duì)照（無(wú)模板）和空白對(duì)照（無(wú)菌水）必須設(shè)置，以監(jiān)測(cè)是否污染。RePure-(D)B雙槽PCR操作簡(jiǎn)便，具有易讀的液晶顯示屏和直觀的操作界面，方便用戶進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。南京雙槽基因擴(kuò)增儀PCR儀

柏恒RePure系列PCR儀進(jìn)行PCR擴(kuò)增可以獲得高度特異性和穩(wěn)定性的擴(kuò)增產(chǎn)物。無(wú)錫QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀電話

引物設(shè)計(jì)與條件優(yōu)化場(chǎng)景：新引物開發(fā)時(shí)，需測(cè)試不同退火溫度（Tm 值）以避免非特異性擴(kuò)增。例：針對(duì)某基因設(shè)計(jì) 5 對(duì)引物，通過(guò)梯度 PCR 同時(shí)測(cè)試每對(duì)引物在 55℃~65℃范圍內(nèi)的比較好退火溫度，直接篩選出特異性條帶**亮的組合。優(yōu)勢(shì)：傳統(tǒng)方法需多次**實(shí)驗(yàn)，梯度 PCR *需 1 次運(yùn)行即可完成多條件驗(yàn)證。復(fù)雜模板的擴(kuò)增優(yōu)化場(chǎng)景：擴(kuò)增富含 GC 堿基對(duì)（>70%）的模板、長(zhǎng)片段 DNA（>5kb）或存在二級(jí)結(jié)構(gòu)的序列時(shí)，需精細(xì)優(yōu)化溫度參數(shù)。例：擴(kuò)增某病毒全基因組（約 15kb）時(shí)，通過(guò)梯度功能測(cè)試不同延伸溫度（如 68℃~72℃）對(duì)產(chǎn)物完整性的影響，確定比較好延伸條件。無(wú)錫QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀電話